CRISPR/Cas基因编辑技术及其在真菌中的应用

CRISPR/Cas系统是细菌和古生菌中抵抗外源病毒或质粒入侵的获得性免疫系统.其中II型CRISPR/Cas系统已被改造成为一个简便、高效的基因编辑工具,并在动物、植物和微生物基因功能研究和遗传改良中得到广泛应用.简述了CRISPR/Cas系统的结构、作用机理及分类情况,归纳总结了CRISPR/Cas9系统在酿酒酵母和其他丝状真菌中的应用,并对该技术可能出现的问题及应用前景进行了展望,以期为真菌基因编辑研究提供参考.
对使用上面发酵酵母、下面发酵酵母和特种麦芽生产的二次发酵小麦啤酒的工艺作了详细的介绍.从原料、工艺、质量等方面对二次发酵小麦啤酒的生产工艺作了简要介绍,为二次发酵小麦啤酒的开发提供了可行的工艺参数.我们确定的产品目标是:感官方面:酯香浓郁,口味醇爽,苦味适宜,色度较浅,CO,含量高,杀口力强;理化方面:麦汁浓度为11°P,苦味质26～28EBC,色度约25～27 EBC.最终发酵度66%～69%.
利用植物纤维作为廉价的糖源生产燃料乙醇是解决世界能源危机的最有效途径.今研究采用海藻酸钙固定普通酿酒酵母细胞和嗜鞣管囊酵母细胞于两个串联的发酵罐内,连续发酵葡萄糖和木糖组成的糖液并与膜耦合来制取酒精.通过硅橡胶膜(PDMS)的渗透蒸发过程,将产品乙醇从发酵液中移出,减少了产物乙醇对发酵的抑制作用.实验结果表明,这套采用海藻酸钙固定酵母细胞进行连续发酵并与膜耦合的生物反应器系统,在稀释率为0.321 h-1下稳定运行,剩余葡萄糖和木糖浓度分别为0.134、4.921 g·L-1,乙醇得率为O.457 g(乙醇)·g-1(糖),是理论得率的92.64%.生产能力达到10.996 g·L-1·h-1.与其它发酵方式相比较,用海藻酸钙来固定细胞并与膜耦合的发酵过程可增大酵母细胞浓度,明显降低乙醇对酵母的抑制作用,并提高糖的转化率.
本发明属于酒曲制备技术领域，尤其是涉及一种白酒酒曲和制备工艺及其酿造白酒后所得酒糟的应用。本白酒酒曲制备工艺包括下述步骤：选用当年收获的新籼米磨粉制得米粉，在米粉中加入辣蓼草粉末、混合药材的粉末或上述混合药材的煎汁、以及适量水，并混合搅拌均匀制得柔性的坯料团；将坯料团切分成均匀的坯料小块，然后将坯料小块进行滚角处理以去除坯料小块的棱角；将坯料小块通过裹粉方式接种白酒酵母，然后入缸并保持缸内温度在30-38℃，时间为24-40小时；从缸中将坯料小块取出并平摊在匾中以使白酒酵母后熟，室温控制在28℃-32℃，时间为20-36小时；将经过后熟的坯料小块晾晒干燥，即得块状酒曲成品；将块状酒曲成品装坛备用。
从酿酒小曲中分离获得优质产酯菌株Y5,经产酯培养基初筛其总酯2.684 g/L,乙酸乙酯含量为2.481g/L.经生理生化实验和分子鉴定,确定Y5菌株为异常威克汉姆酵母(Wickerhamomyces anomalus).通过采用单因素和四因素四水平正交实验对该菌产酯条件进行优化,试验结果表明在初始pH 4、乙醇体积分数4％的培养基中30℃恒温发酵3d为最适产酯条件,其Y5菌株总酯产量为4.065 g/L,乙酸乙酯产量3.677 g/L.相比优化之前,其总酯含量显著提高51.5％,乙酸乙酯含量显著提高48.2％.
本发明涉及发电机技术领域，且公开了一种白酒酿造用搅拌装置，包括搅拌腔体，搅拌腔体内通过第一轴承转动连接有圆板，圆板的中心处固定连接有第一转杆，且第一转杆的顶部贯穿搅拌腔体的顶部并延伸至外部设置，搅拌腔体内还设有两个第二转杆，且两个第二转杆关于第一转杆呈对称设置，两个第二转杆的顶部均贯穿圆板的顶部设置，且两个第二转杆通过第二轴承与圆板转动连接，搅拌腔体的内壁固定连接有齿圈，且齿圈位于圆板的上方设置，两个第二转杆的顶部均固定连接有齿轮。该白酒酿造用搅拌装置，能够对搅拌腔体内的白酒进行均匀的搅拌，提高了白酒的发酵速度，同时能够间歇地对搅拌腔体内气体的排放，减小了劳动力。