脂肪酶基因克隆、序列分析、表达及其催化特性

分别以R.miehei 3.4960基因组和总RNA为模板,通过PCR和RT-PCR扩增得到脂肪酶全长基因和脂肪酶cDNA碱基序列,两碱基序列测序结果比对表明:脂肪酶DNA碱基序列由5个内含子和6个外显子组成,5个内含子大小分别为75、58、64、73、59bp,位于DNA序列(以起始密码子ATG的碱基A为1)的600～674位、929～986位、1076～1139位、1227～1299位、1382～1440位碱基处.脂肪酶RML mRNA碱基序列与已公布的R.miehei脂肪酶基因mRNA(EMBL Nucleotide Sequence Database Accession No.A02536)碱基序列有5个碱基的差异,其编码的氨基酸序列有1个发生了改变.利用酿酒酵母表达质粒pICAS1,实现了脂肪酶RML基因在酿酒酵母中的高效分泌表达,并对重组脂肪酶RML进行了相关酶学性质分析.酶学性质研究表明:重组酶的最适反应温度为45℃,最适pH值为8.6;该酶偏爱中链长的酯(C8～C12),对12个碳的酯具有最佳活性,对C16长链酯也有较高的活性,对短链酯的活性较弱;金属离子Cu<'2+>、Fe<'2+>对酶活性有显著抑制作用,Ca<'2+>和Mg<'2+>对酶活有部激活作用.
以酱香白酒窖池第四轮次不同深度酒醅为研究对象,采用纯培养技术与高通量测序技术相结合的方法检测其微生物多样性及群落结构组成,同时利用仿生学技术与常规理化分析手段测定其品质.结果表明,第四轮次不同深度出窖酒醅中菌落总数、乳酸菌、霉菌和酵母菌活菌数均为上层>中层>下层,且含量均高于105 CFU/g,窖池不同深度酒醅水分、还原糖、淀粉、蛋白质含量及酸度差异均不显著(P>0.05).从感官上看,下层酒醅芳香味更浓而苦涩味也更重.测序分析显示,不同分层酒醅共检测出50个细菌属和74个真菌属,其细菌群落组成较为相似,绝对优势细菌属为Lactobacillus(91.59％);各分层真菌组成明显不同,种类较细菌更为丰富,相对含量最高的为Thermoascus(33.45％).关联分析表明,第四轮次酒醅微生物群落间存在着复杂的生物学过程,相较于细菌,真菌菌属与理化指标间的相关性更为复杂,Thermoascus、Rasamsonia和Aspergillus可能是酒醅发酵过程中的关键菌种.综合分析,纳入研究的同一窖池不同空间分布酒醅中下层酒醅微生物组成及风味更为独特。
本实用新型涉及一种双层玻璃高脚白酒杯，包括杯体、杯腿、杯座，其特征是：杯体由内层杯壁和外层杯壁构成，内层杯壁的下部为圆弧形，外层杯壁的上部是一段弧线的圆周旋转体、下部为圆锥形，内层杯壁的上沿与外层杯壁的上沿连接，使内层杯壁与外层杯壁间构成一个密闭的中空腔体，外层杯壁的底部弧形过渡与圆柱形杯腿连接，圆柱形杯腿弧形过渡与圆盘形杯座连接。其优点是：造型高雅、便于手拿、杯子体量大容酒量小、适合宴会主持仪式，且有保温效果。
通过试验选取挤压膨化工艺参数组合为:挤压机模孔直径Ф=11mm,套筒温度T=170℃,脱胚玉米含水量W=13%,螺杆转速160 r/min.在此参数下获得的物料,与未膨化样品对比,酿酒酵母在膨化物料中酵母数最高值可由1.68 × 108/mL升至2.67×108/mL.酵母增代时间可由16.03 h缩短至13.36 h.添加营养盐尿素和KH2PO4后此种效果更加明显,这种处理有可能使发酵时间缩短.
啤酒行业的高速灌装包装线上,广泛应用无压力输送控制技术.现就某灌装包装线的验瓶机至啤酒灌装机段的瓶输送带无压力控制进行改造,探讨在无压力输送中,瓶流输送与啤酒灌装机运行速度平稳协调的方法.实践证明,控制系统的改造,对比原有啤酒瓶输送控制系统,大幅度降低了啤酒瓶碰撞冲击力,进而降低了卡瓶、爆瓶率,确保了啤酒灌装机的进瓶数量,大大提高了灌装包装线的生产效率.
以氨和硫化氢的去除率为考评指标，从生活垃圾中筛选出4株高效除臭菌株，根据各菌对氨和硫化氢去除能力的差异及菌株间功能互补作用，能动地构建了4个微生物除臭菌群，在实验室条件下进行了除臭试验及室内垃圾除臭试验，结果表明：菌群1（由干酪乳杆菌和酿酒酵母组成）的除臭效果最好，在实验室条件下对氨的去除率达88．3％、硫化氢的去除率达75．3％；在垃圾除臭试验中，该菌群也有效地降低了垃圾的恶臭味。