梨酒酵母的筛选及鉴定

以梨的果皮和梨园土壤作为分离源进行梨酒酵母的分离、筛选,期望得到发酵性能好的适合于梨酒发酵的菌株。首先对酵母菌富集培养和分离,再通过TTC平板一级筛选,杜氏发酵管二级筛选,三角瓶发酵三级筛选,得到菌株YDJ05。实验结果表明该菌株在梨汁中发酵能力较强,产酒精能力较好,即发酵7d产酒率达到8.8%,且残糖较低,产香较好,可作独立的发酵菌株使用。经过26S rDNA D1/D2区序列分析,鉴定为酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）,命名为Saccharomyces cerevisiae YDJ05。
本文在建立白酒中邻苯二甲酸二正辛酯(Di-n-octyl phthalate,DNOP)、间苯二甲酸二异辛酯(Dioctyl Isophthalate,DOIP)、对苯二甲酸二辛酯(Bis(2-ethylhexyl) terephthalate,DOTP)的气相色谱质谱联用分析方法的基础上,对正己烷提取、无水硫酸钠干燥后的样品进行测定.结果 表明:三种化合物的检出限为0.02 mg/kg,方法的线性范围为0.025～0.5 μg/mL,DNOP、DOIP、DOTP线性相关系数分别为0.999 2、0.999 3、0.999 5,在3个加标水平(0.025、0.1、0.5 mg/kg)下的加标回收率为89.8％～113.5％,相对标准偏差(RSD)为1.3％～9.7％(n=3),该方法前处理简单快捷,方法灵敏度高,准确性好;采用本方法测定市售白酒中的DNOP、DOIP、DOTP,部分样品检出DOIP、DOTP.
为探明铁皮石斛超微饮片与传统饮片对微生物生长的影响,明确中药超微饮片的优越性,选用生长受铁皮石斛影响明显的2种微生物,通过液体培养比浊法研究了铁皮石斛超微饮片与传统饮片的作用效果.结果表明,铁皮石斛超微饮片和传统饮片对酿酒酵母的生长都有促进作用,且超微饮片的效果优于传统饮片,其中0.08～0.12 g/mL铁皮石斛超微饮片对酿酒酵母生长的促进效果与传统饮片相比差异达显著或极显著水平.铁皮石斛超微饮片和传统饮片对大肠杆菌的生长都有抑制作用,并且超微饮片的效果强于传统饮片,其中0.04～0.08 g/mL铁皮石斛超微饮片对大肠杆菌生长的抑制效果与传统饮片相比差异达显著或极显著水平,0.10 g/mL铁皮石斛超微饮片对大肠杆菌生长的抑制效果与传统饮片相比没有显著性差异.可见,超微饮片的有效物质浸出率高于传统饮片,超微技术有利于中药成分的溶出.
本发明属于食品加工领域，尤其涉及一种白酒籼米散曲的制备方法，应用于小曲白酒生产领域，在白酒酿造过程中主要起糖化、发酵作用，其特征在于：包括以下步骤：淘洗、浸泡、分装三角瓶、蒸米、冷却、接种、恒温培养和摇瓶、贮存：当米粒表面张满菌丝，米粒微微泛黄时即成，保存。本发明具有操作简单、使用方便、酶活力高、劳动强度低、易实现机械化生产等优势。
杨梅果酒采用游离酵母发酵时,由于微生物所产生的β-D-葡萄糖苷酶对果汁中的呈色花色苷有脱糖作用,导致其失色或降解,从而使杨梅果酒失去鲜艳的红色.为了解决这一问题,本研究采用海藻酸铝固定化酿酒酵母(商品名分别为安琪,Lalvin D254,Lalvin BM45,and Lalvin L2323)代替游离酵母发酵杨梅果酒,对四种固定化酿酒酵母的花色苷稳定作用进行了试验.结果表明四种酵母的海藻酸铝固定化发酵均表现出明显的护色效果,经过20d发酵后,呈色花色苷保存率分别为50%(D254)、46.4%(安琪)、45.5%(L2323)、42.7%(BM45),而在相应品种的酿酒酵母的游离细胞发酵时,保存率仅分别为22.7%、20.9%、24.5%、26.3%.这种保护作用主要来自于海藻酸铝固定化细胞珠致密外层的物质低扩散性、后期酒精对的抑制作用以及形成铝离子对花色苷的稳定作用.另外,在发酵前期,海藻酸铝固定化酵母的平稳发酵速度和慢速消耗酒醪中的二氧化硫对最后的呈色花色苷保存率也有重要意义.
采用PCR技术从S.cerevisiae TCCC 31012菌株的染色体DNA中扩增得到S-腺苷甲硫氨酸合成酶-2基因(sam2),将sam2克隆到酿酒酵母表达载体pACT2的强启动子PADHI控制下,以构建高效表达质粒,并在酿酒酵母亮氨酸缺陷型茵株YS58中表达.重组质粒经鉴定含有sam2基因.工程菌YS58-2表达产物经SDS-PAGE,结果显示重组菌S-腺苷甲硫氨酸合成酶的分子质量约为43ku,经凝胶电泳扫描,表达带约占菌体总蛋白的14%.YS58-2菌株培养72 h的SAM合成酶活力为16.5 U/mg茵体蛋白,较出发菌S.cerevisiae TCCC 31012提高了40.3倍,较受体菌YS58提高了32倍.