黄酒酵母HO基因的敲除及其对黄酒发酵的影响

为对黄酒酵母菌株的遗传学进行研究,对黄酒酵母利用基因敲除技术敲除HO基因,通过Mcclary产孢培养基于25℃条件下培养5～7 d,得到a和α两种不同配型且配型不会发生转变的黄酒酵母单倍体菌株,通过群体杂交,成功获得了全敲除HO基因的二倍体酿酒酵母菌株黄酒酵母11-1-HOΔ,用于黄酒发酵实验.结果表明:通过基因工程手段敲除HO基因对黄酒发酵无显著影响,可用于工业生产中,且黄酒酵母11-1-HOΔ具有代表性,获得的单倍体是进一步研究黄酒酵母遗传基础和代谢机制的重要材料.
为探讨铁离子对果酒酵母菌生长的影响,用含有不同浓度Fe2+的YEPD培养基对1450果酒酵母进行培养,利用邻菲罗琳比色法和血球计数方法分别测定铁含量和酵母菌数目.试验结果:用加铁离子培养基培养的酵母菌的生长曲线均低于空白组:在1.00 m01/L Fe2+浓度下,果酒酵母菌的总铁含量最高且与空白组差异极显著;2.08 mol/L Fe2+浓度组显著性地低于空白组,且3.00 mol/,L Fe2+浓度下的总铁含量最小.结论:不同浓度Fe2+对果酒酵母生长有显著的抑制作用,且抑制作用显著不同.
目前,大部分农村沼气池存在着沼气产量不高的问题,而一些外源添加物可以通过加速厌氧发酵的水解速率或刺激产甲烷菌的新陈代谢过程提高沼气产量.该文分别以猪粪和产甲烷培养基为底物进行厌氧发酵,筛选出能提高沼气产量的外源添加物,并将其进行优化组合,得出最佳用量.试验结果表明:以猪粪为底物进行发酵时,添加啤酒糟能促进底物水解、提高产气量,前4 d的池容产气率比对照高23.17%;以产甲烷培养基为底物时,蛋白胨氨基酸等混合物(物质M)和微量元素液Ⅱ均可刺激产甲烷菌代谢、促进产气,发酵第23 d的累计产气量分别比对照高51.02%和13.37%;随后将筛选出的三种外源添加物进行以猪粪为底物的正交及验证试验,综合考虑促气效果及经济性得出最优组合为微量元素液Ⅱ 10 mL/L,啤酒糟2.5 g/L,物质M 0.05 g/L,该组合在沼气池试验中能提高28.46%的产气量.该试验结果为一种沼气促进剂的研制奠定基础.
本实验用乳酸菌发酵,分离乳酪得其乳清.以乳清为主要原料,添加啤酒花,按啤酒酿造工艺,经啤酒酵母发酵,获得低酒精、清凉型的乳清啤酒.结果表明,发酵液在自然pH值时,主发酵期在接种后2～4天,发酵效果最佳.当发酵温度在10～25℃,接种液在2.5%时,酒液各项指标及风味为满意.
针对贺兰山东麓大面积酿酒葡萄园因土壤瘠薄、过度依赖化肥而导致产量低且不稳等问题,采用田间试验结合室内分析,研究生物有机肥不同施用量(0、3、6、9、12、15 t/hm2)对该区酿酒葡萄生长、养分吸收及产量品质的影响.结果表明:在一定生物有机肥施用量范围内,随施用量的增加,酿酒葡萄叶绿素含量比对照提高,新稍长增加3.19％～24.41％,百叶鲜质量增加2.91％～13.26％,而百叶干质量增幅为11.71％～26.30％,有利于干物质累积；施有机肥促进了叶部全氮、全磷、全钾含量的吸收,叶片全氮、全磷、全钾分别增加0.60％～12.93％、46.94％～82.65％和6.94％～17.14％；叶柄全氮、全磷、全钾分别增加9.04％～48.59％、112.50％～226.14％和5.87％～40.47％,有利于干物质合成,从而比对照增产360.05％～554.14％,果实总糖含量提高1.11～1.94个百分点,总酸度下降0.18～0.27个百分点,糖酸比增大10.04～16.13个百分点；但有机肥施用量超过12 t/hm2时,对3年生酿酒葡萄生长、氮磷钾吸收和产量等产生明显抑制作用.经肥料效应方程计算得出,该区3年生酿酒葡萄最高产量和最佳经济效益的生物有机肥施用量为11.45 t/hm2和10.01t/hm2.
为研究棘托竹荪Dictyophora echinovolvata乙醇提取物对食品腐败菌和植物病原菌的抑菌作用,以不同体积分数乙醇溶液为提取剂,对棘托竹荪子实体进行浸提,通过单因素和正交试验测定了乙醇体积分数、料液比、浸提时间和浸提温度等4个因素对棘托竹荪提取物抑菌效果的影响,获得的最佳提取工艺为乙醇体积分数90％,料液比50.0 g·L-1,浸提时间2.0 h,浸提温度75℃.用牛津杯法和菌丝生长速率法分别测定了棘托竹荪乙醇提取液对食品腐败菌与植物病原菌的抑菌作用.结果表明:棘托竹荪乙醇提取液对食品腐败细菌和植物病原真菌均具有抑制作用,但对啤酒酵母不表现抑制作用.在供试的4种食品腐败细菌中,抑菌效果从高到低依次是金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus,枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis,蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus,大肠埃希菌Escherichia coli,抑菌圈直径分别为24.08,23.12,23.02和22.16 mm,可见棘托竹荪乙醇提取液对革兰氏阳性细菌的抑菌效果显著大于革兰氏阴性细菌.在供试的5种植物病原真菌中,抑菌效果从高到低依次为玉米大斑病菌Exserohilum turcicum,油菜菌核病菌Sclerotinia sclerotiorum,番茄灰霉病菌Botrytis cinerea,小麦赤霉病菌Fusarium graminearum,苹果腐烂病菌Valsa mali,抑菌率分别为75.01％,57.67％,49.65％,21.34％和9.26％,且五者间均存在显著性差异(P＜0.05),可见棘托竹荪乙醇提取液对真菌的抑菌作用因菌种而异.