黄海海域沉积物和庐山土壤样品中放线菌的分离、活性及生物多样性研究

本研究采用均匀实验设计优化预处理条件来分离黄海海泥和庐山土壤样品中的放线菌。通过均匀实验得到最优的预处理条件为湿热50℃处理20 min，不进行超声处理以及添加苯酚。经过形态排重后，从海泥和庐山样品中分离得到86株和11株不同表型的放线菌。通过进一步的分子生物学鉴定，海泥中的86株放线菌分别属于3个不同的属，而庐山样品的11株分别属于4个不同的属。对这97株放线菌进行抗菌实验发现，18．5％的菌株对大肠杆菌有抑菌活性，7．2％的菌株对枯草芽孢杆菌有抑菌活性，但对酿酒酵母都无抑菌活性。
白芨是兰科(Orchidaceae)白芨属(Bletilla)植物,多年生草本,块茎供药用,具有补肺止血、消肿生肌等功能,是常用的收敛止血类中药.白芨还可作庭院观赏植物,并用在护肤化妆品,高级卷烟烟蒂胶,工业上的糊料、浆丝绸、浆纱或作涂料等原料,以及酿酒等行业中广泛应用.
通过对杭州啤酒厂清洁生产示范工程的回顾评价和追踪评价,不仅可再现以往的成果,而且可了解该示范工程的进一步发展情况,有利于对示范工程长期效益进行评估和示范工程的成败进行总结,因此,这是一项务实的的制度.
本发明生产芝麻香型白酒的新方法涉及酿酒技术领域。以Aspergillusoryzae的As3.951米曲霉菌种及与其相适应的工艺与设施技术；粉碎的高粱、粉碎的小麦、麸皮为主料，加主料8％重量的水获润料，润料与芝麻香型白酒已蒸馏完酒后的酒醅混合制成的新酒醅蒸制后摊凉加新酒醅15％重量的高温大曲、新酒醅10％重量的中温大曲、新酒醅20％重量的用于替代河内氏曲霉麸曲的As3.951米曲霉麸曲，对混合后控品温28-32℃时制成的堆积醅堆积培养、中途翻堆一次，至品温46-49℃时入窖池发酵，发酵后分层蒸馏的分层蒸馏原酒分别储藏。用于芝麻香型白酒生产。选新菌种、定新工艺、原料充分利用、标准化生产。
以发酵度较高的非絮凝性的啤酒酵母菌株X6和发酵度较低、絮凝性较强的啤酒酵母菌株N1为亲本进行原生质体融合.用亚硝酸诱变原养型的菌株X6,经筛选得到一株需酪素水解物的营养缺陷型菌株X6～20.采用正交试验法分别优化菌株X6～20和N1的原生质体形成和再生的条件.用X6～20菌株的原生质体作为受体和热灭活的N1菌株原生质体作为供体进行融合.融合株经三角瓶发酵筛选,得到一株较优良的融合株GR5.该融合株的絮凝性较强(本斯值为2.7),以12°Bx麦芽汁为培养基,用500L的发酵罐在12℃下发酵,发酵至第8 d菌株GR5的发酵度为69.2%,发酵液中的双乙酰含量为0.0498 mg/L、乙醛含量为6.34 mg/L,总高级醇含量为74.4mg/L.融合株GR5具有双亲的优点,发酵的啤酒风味较好,是一株具有工业应用前景的啤酒酿造酵母菌株.
蒎烯可衍生为高能量密度燃料,但在酿酒酵母中的全生物合成却未见报道.酿酒酵母由于拥有强大的蛋白表达和翻译后修饰系统以及完整的内膜系统,相比于大肠杆菌等原核生物更适于P450等蛋白的表达,因此将酿酒酵母作为宿主细胞,对于蒎烯或者其他物质实现如"疯狂碳环"的高能量化是至关重要的.本研究在酿酒酵母底盘中表达内源焦磷酸香叶酯合成酶(ERG20)的突变体ERG20ww和火炬松来源的蒎烯合酶(PtPS)构建了蒎烯的合成路径.通过截短PtPS N端2～51位氨基酸残基(tPtPS),蒎烯产量较初始产量(0.329 mg·L-1)提高了2.23倍.在过表达异戊二烯焦磷酸异构酶(IDI1)和RNA聚合酶Ш负调控因子(MAF1)的基础上,表达ERG20ww和tPtPS的融合蛋白,蒎烯产量进一步提高了5.16倍.通过将内源基因ERG20启动子原位替换为弱启动子HXT1,下调ERG20的转录,蒎烯的产量提高了26.0%.最终通过调节发酵过程中的培养基pH使蒎烯产量达11.7 mg·L-1,较初始产量提高了34.5倍.本研究在酿酒酵母中实现蒎烯的从头合成,并获得已知蒎烯摇瓶水平的最高产量.