D2-43病毒E蛋白在酵母细胞表面的展示

目的:在酵母细胞表面展示登革2型病毒43株(D2-43)的E基因,探索利用酵母表面展示系统建立DNA改组筛选平台的可行性.方法:通过RT-PCR扩增获得D2-43的E基因,将该基因亚克隆至T载体后,再克隆至酵母表面展示载体pYD1,于酿酒酵母EBY100中利用半乳糖进行诱导表达.表达产物采用间接免疫荧光法和FACS进行检测.结果:酵母表面展示产物可与D2-43的腹水抗体特异性地结合;在半乳糖诱导后24 h,展示E蛋白的酵母细胞百分数达22.07%.结论:本研究为建立基于酵母表面展示系统的DNA改组筛选平台奠定了基础.
本发明涉及一种绵甜型芝麻香白酒的勾调方法，属于白酒开发技术领域。本发明所述的绵甜型芝麻香白酒的勾调方法，是将芝麻香发酵好的糟醅分层起糟，再进行分型接酒，按照浓香型白酒生产工艺制得醇甜型陈年老酒，然后将分型接酒得到的原酒和醇甜型陈年老酒进行勾调，得到绵甜型芝麻香白酒。本发明勾调的绵甜型芝麻香白酒，达到芝麻香型白酒兼具浓、清、酱三种香型白酒的特点，不仅具有类似焙炒芝麻的香气，口感醇厚，风格独特，而且绵甜纯净，圆润爽口，容易入喉，更接近消费者的口感和味觉，解决了传统芝麻香型白酒的口感缺陷，满足了人们个性化舒适化的消费需求。
引进赤霞珠、美乐、琼瑶浆、霞多丽、白诗南、贵人香和烟73等7个酿酒葡萄品种,研究各品种的净光合速率、气孔导度、胞间CO2浓度、蒸腾速率和叶肉瞬时羧化速率等光合作用参数及各参数之间的相关性.结果表明,7个品种的光合特性有显著差异.贵人香净光合速率最高,具有高产潜能;蒸腾速率最大,在干旱季节或降雨较少的地区栽培,需及时灌溉补充水分.赤霞珠蒸腾速率最小,具有较好的耐旱性和节水性.
本发明公开了一种蟠桃白酒的制备工艺，蟠桃酒采用新疆无污染新鲜蟠桃为原料，经过筛选、洗净、除核、加果胶酶打浆得蟠桃浆、加入耐酸性酿酒活性干酵母低温发酵，所得发酵醪经塔式蒸馏和壶式蒸馏，催熟、勾兑、橡木桶陈酿，最终得到45-65度的蟠桃白酒产品。蟠桃白酒产品具有明显的蟠桃香气，口味柔和、醇净，外观清亮透明，不易“上头”，饮后果味余香长久，是一种以果代粮制酒的方法，使蟠桃有了一种新的工业化深加工的途径，提高了其利用率，增加了经济效益。
采用系列稀释法和平板涂布法从黑龙江漠河地区的永久冻土层20份土壤样品中分离得到172株细菌菌株，经平板对峙法初筛得到10株拮抗菌，经复筛得到了1株对甘蓝枯萎病菌有较强抑制作用的拮抗细菌MH71菌株。通过菌落形态观察、生理生化测定、16S rDNA和16S~23S rDNA之间的ITS特异性序列分析等，表明MH71菌株为解淀粉芽孢杆菌( Bacillus amyloliquefaciens)。该菌株对镰刀病菌、灰葡萄孢及炭疽病菌等15种农业生产上常见的植物病原真菌和黄瓜角斑、平菇褐斑、大白菜黑腐和啤酒酵母菌等植物病原细菌和酵母菌均有不同程度的拮抗作用，表现出广谱抗菌活性。此结果表明：MH71菌株是一株极具开发潜力的生防菌株。
【目的】研究目的基因YBR 019C 缺失对酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae ）菌株糖代谢和乙醇发酵的影响。【方法】以酿酒酵母野生菌 NF1002为出发菌株，选择2号染色体上的基因 YBR 019C 为目的基因，以质粒pUG6和 pUG66为模板进行 PCR，构建带有 Cre/loxP 系统的酿酒酵母YBR 019C 基因敲除组件，并转化酿酒酵母 NF1002，利用筛选标记 Kan r和 Ble r与YBR 019C 基因进行同源重组，筛选YBR 019C 双倍体缺陷型菌株。利用蔗糖和甘蔗糖蜜为碳源，对突变菌进行发酵特性的研究。【结果】成功获得YBR 019C 双倍体缺陷型菌株 NF-ybr。碳源同化实验表明，突变株和野生菌均能利用葡萄糖和蔗糖，不能利用乳糖和木糖；但相比野生菌，突变株利用棉子糖和麦芽糖的能力有所下降，而且完全不能利用半乳糖。蔗糖发酵实验表明：突变株 NF-ybr 与野生菌株相比，在发酵终点乙醇浓度提高10．7％，发酵周期有所延长。按目前甘蔗糖蜜乙醇生产的发酵工艺，突变株在30℃发酵72h 的醪液乙醇含量为12．52％，低于野生菌的13．89％。【结论】YBR 019C 基因的缺失影响了菌株对糖份的利用，导致乙醇发酵能力不及野生菌。本研究为菌株高效快捷的基因改造提供了参考。