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红佳酿酵母β-葡萄糖苷酶的分离纯化及酶学性质

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-06-26 阅读:827
以红佳酿酿酒酵母为出发菌株,通过离子交换法分离纯化β-葡萄糖苷酶,测定酶活力和蛋白质含量,并研究温度、pH值稳定性和金属离子、葡萄糖、酒精度对酶活力的影响.结果表明:粗酶液经过离子交换层析后,纯化倍数为19.41,得率为38.67%;经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gelelectrophoresis,SDS-PAGE)电泳检测为1条谱带,达到电泳纯,分子质量约为45 kD;β-葡萄糖苷酶热稳定性较差,在20~40℃较稳定,在pH 5.0~10.0较稳定;Al3+、Cu2+对酶活力有抑制作用,K+、Mg2+、Ca2+、Zn2+、Na+对酶活力的影响不明显;葡萄糖和酒精对酶活力无明显抑制作用.
将叠氮溴乙锭(ethidium bromide monoazide,EMA)与聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术相结合,以酒花耐受基因horC为靶基因,用啤酒腐败短乳杆菌基因组DNA作为模板进行扩增.结果发现,在前处理过程中加入EMA,当终质量浓度小于20 μg/mL时,对活的短乳杆菌中靶基因的扩增没有明显抑制作用;而当EMA终质量浓度为1.0 μg/mL时可有效抑制105 CFU/mL短乳杆菌死细胞的扩增.本实验建立的EMA-PCR检测方法的灵敏度为104活细胞/mL酒液样品.验证实验结果表明,在13株乳酸菌中,建立的horC特异性EMA-PCR能有效检测到其中的全部5株啤酒污染菌,同时可区分这5株菌的活/死细胞混合体系,降低检测过程中的假阳性.
发明公开了一种固液法白酒生产方法,包括固态发酵白酒酿造、基酒处理、固态发酵白酒与基酒的勾调步骤;其中,固态发酵白酒酿造的步骤包括:原料的处理;原料和酒糟、水混合均匀,进行蒸煮;在原料中加入酒曲,再加入水,并混合均匀后放入发酵装置中,在35?37℃条件下发酵24小时,得一次发酵物;将所述一次发酵物置于发酵装置桶内,于35?37℃条件进行二次发酵,发酵时间为45?60天,得二次发酵物;将发酵好的发酵物取出,装入蒸馏装置进行蒸酒;所述基酒处理的步骤为:利用活性炭对基酒进行吸附;最后将固态发酵白酒与基酒勾调。本发明具有原料来源方便价格低廉、工艺简单、发酵条件温的优点。
通过体外(in vitro) 培养法研究了湖北地区不同分级指数(grading index, GI) 的粗饲料及粗饲料与精饲料之间的组合效应.结果表明:粗饲料之间按照1:1 组合出现了明显的正组合效应.以组合效应多项指标综合指数(multiplefactors associative effects index, MFAEI) 来比较, 玉米(Zea mays) 青贮和羊草(Leymus chinensis) 组合效应最明显, 为1.40;其次为玉米青贮和啤酒糟组合,MFAEI 为1.07;羊草和稻秸组合最低,MFAEI 为0.52.此外,不同组合粗料与精料之间也出现了明显的正组合效应.其中以玉米青贮、羊草和精料组合最为明显,MFAEI 为0.37;玉米青贮、啤酒糟和精料组合最低,MFAEI 为0.24.这说明,在生产实践中,利用GI 指数结合组合效应对粗饲料和精饲料合理搭配使用,可充分发挥正组合效应,控制负组合效应,防止饲料浪费,提高动物生产性能.
本发明涉及一种清芝复合香型白酒的酿造方法,其特征是:按如下步骤进行:酿制清香大楂酒:以高粱为原料,通过润糁、蒸糁、出甑加水、翻拌扬冷、加清香大曲、入池发酵、装甑蒸馏,制出清香大楂酒;酿制清芝复合香型二楂酒:以大楂馏酒结束后的糟醅为原料,以小麦和麸皮为辅料;加入白曲、混合酵母曲、细菌曲、高温大曲、中温大曲、芝麻曲,堆积后入窖池发酵,蒸馏出酒;回糟发酵:在醅糟中加入大曲、白曲、酵母曲、细菌曲,在二楂窖底进行回糟发酵、出池蒸馏。其优点是:采用纯粮酿制,酿造方法结合了低温和高温发酵工艺,酿造出的清芝复合香型白酒清亮透明,清芝谐调,复合幽雅,酒体醇和细腻,谐调爽净,余味悠长。
通过对垦啤麦10和垦啤麦7号2a区域试验的结果比较,以不同年份不同地域的增产幅度、变异系数、高稳系数为参数,分析二者的高产稳产性,结果表明垦啤麦10高产稳产性均优于垦啤麦7号,是能够替代垦啤麦7号的大麦新品种。

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