葡萄白藜芦醇合酶基因cDNA克隆及原核表达

从贝达葡萄中提取总RNA,采用RT-PCR方法,克隆到了白藜芦醇合酶(resveratrol synthase,RS)基因的全长cDNA.将其与圆叶葡萄(Vitis rotundifolia)、华东葡萄(Vitis pseudoreticulata)、河南毛葡萄(Vitis ficifolia)、河岸葡萄(Vitis vulpine)、酿酒葡萄(Vitis virufera)、羊蹄甲(Bauhinia)、花生(Arachis hvpogaea)、虎杖(Polygonum cuspiaatum)、大黄(Rheum officinale)进行氨基酸同源性比对,结果表明:分离的RS基因与其他葡萄的RS基因编码的氨基酸同源性达到97％以上,与其他属的RS基因编码的氨基酸同源性达到64％以上.生物信息学分析表明,该蛋白分子量为43kD,等电点pI=6.2,包含392个氨基酸残基.将RS的全长cDNA插入到表达载体pET28a中构建重组表达质粒pET28a-RS,转化大肠杆菌BL21,SDS-PAGE电泳检测结果表明,以30C、0.5mmol·L--1PTG诱导4h时该基因表达效果最好,诱导产物为1个约43kD的蛋白,为进一步纯化和鉴定目的蛋白提供了基础.
动态贝叶斯网络(DBN)是基因调控网络的一种有力建模工具.贝叶斯结构期望最大算法(SEM)能较好地处理构建基因调控网络中数据缺失的情况,但SEM算法学习的结果对初始参数设置依赖性强.针对此问题,提出一种改进的SEM算法,通过随机生成一些候选初始值,在经过一次迭代后得到的参数中选择一个最好的初始值作为模型的初始参数值,然后执行基本的SEM算法.利用啤酒酵母细胞周期微阵列表达数据,构建其基因调控网络并与现有文献比较,结果显示该算法进一步提高了调控网络构建的精度.
本发明公开了一种利用白酒丢糟固液结合发酵生产浓香型白酒用天然香精的方法，白酒丢糟经添加糖化酶、酸性蛋白酶、耐高温活性干酵母、中温大曲、纤维素酶入窖进行固态发酵后，再通过添加根霉、红曲、高温大曲以及丢糟酒和浓缩己酸发酵液入窖进行固液结合发酵，发酵酒醅经萃取蒸馏、分段浓缩、勾兑复配得到浓香型白酒用天然香精产品。本发明成本低，生产周期短，如形成生产规模8000t/a产品，可达到年处理丢糟35000t，对区域环保起到了巨大作用。同时，以该天然香精作为酿造调味液，可避免因添加合成单体香料带来的“浮香”，从而增强了白酒的自然感和固态感，提升了白酒的品质。
研究建立了果汁中酿酒酵母的实时荧光PCR快速检测方法,并用于实际样品的检测,用活菌计数方法进行了验证.实时荧光PCR方法检测果汁中的酿酒酵母,全过程仅需约5h,检出限为单个的酿酒酵母细胞.本研究建立的实时荧光PCR检测方法大大缩短了果汁中酿酒酵母检测所需的时间,为果汁生产过程及产品中酿酒酵母的快速、灵敏检测提供了有效的技术手段 同时,本研究建立的实时荧光PCR方法可用于酿酒酵母的鉴定,与常用的生化鉴定方法相比,简化了鉴定步骤,提高了鉴定准确性,缩短了鉴定时间.
随着社会快速的发展,传统的白酒酿造方式越来越难以适应现代化生产的需要,因此近年来众多知名白酒酿造集团积极研究探索机械化的酿酒方式,并获得不同程度的成功.对近年来白酒酿造行业机械化技术设备的应用现状进行概述,同时结合现状对今后的白酒酿造机械化技术设备发展方向进行展望.
面引子是传统面食加工中发酵剂,以前对其微生物的研究大多集中于分离培养法,本实验旨在采用新一代高通量测序技术揭示传统面引子中的真菌群落结构特征.从我国不同地区收集18个民间面引子样品,基于宏基因组采用聚合酶链式反应扩增ITS1区,Illumina MiSeq测序,云平台分析样品中真菌群落.结果表明:18个样品中发现101个操作分类单元,属于真菌界4个门、9个纲、15个目、25个科、38个属、56个种;酿酒酵母是大多数样品中的优势菌;酿酒酵母、Fungi sp.、unclassified_k_Fungi这3个种在所有样品中都存在,而且数量较大;Kazachstania bulder、戴尔凯氏有孢圆酵母、矮小假丝酵母、光滑假丝酵母菌、清酒假丝酵母这5个种数量较大,但只在单个样品中出现;异常威克汉姆酵母、Alternaria sp.和帚状曲霉数量相对多一些,出现频率较高,在绝大多数样品中都有分布.各样品真菌群落结构相差不大,而且类型和地理分布差异也不明显.