香菇低温胁迫应答基因的克隆及其表达分析

用RT-PCR和RACE(rapid amplification of cDNA ends)技术相结合,从香菇(Lentinula edodes)苏香菌株中得到了1个与低温胁迫相关的全长2 432 bp的cDNA,该基因含1个1 962bp的开放式阅读框,基因组序列分析发现该基因有11个内含子.经数据库同源查找及序列比较,发现该基因编码的氨基酸与青霉菌(Penicillium nordicum)的聚酮合酶和酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的α-氨基己二酸还原酶分别具有30%、22%的同源性和46%、40%的相似性.表达谱分析表明,当低温胁迫的温差为5℃时,该基因即开始表达,但mRNA丰度较低;温差达到10℃时,mRNA达到最大表达量;低温胁迫处理后,该基因在菌丝转色前的表达丰度低于转色后的丰度.将该基因初步命名为ICS(gene induced under cold stress,GenBank登录号为DQ211659),并初步推测该基因可能参与了低温胁迫的信号传导,低温胁迫信号在影响氮代谢后进而诱发子实体的形成.
目的:了解广州市番禺区长期饮酒者的饮酒情况及危害认知情况,为制定有针对性的健康教育和干预措施提供科学依据.方法:在广州市番禺区通过普查确定长期过量饮酒人群2639人,以其为研究对象采用自行设计的调查表进行现场问卷调查.结果:广州市番禺区长期饮酒者以男性为主(93.63％),年龄以60岁及以上为主(46.72％);饮酒时间集中在20～29年(35.81％),饮酒种类以白酒(38.50％)和啤酒(30.92％)为主,高达38.95％的饮酒者每天饮酒;高达64.72％的饮酒者饮酒过程中感到愉悦,仅16.71％的饮酒者表示有戒酒的意愿,15.69％的饮酒者对于少喝酒完全无计划;68.78％的饮酒者认为长期过量饮酒会产生急性脑血管意外,78.33％的饮酒者认为长期过量饮酒会导致高尿酸和痛风.结论:广州市番禺区长期饮酒者对于长期过量饮酒的危害认知不足,相关健康意识较为缺乏,应加强以社区为基础的健康教育及采取必要的干预措施.
为解决柑橘果酒营养功能单一、香气滋味结构欠佳等不足,实验研究了柑橘分别与不同用量苹果、雪梨、猕猴桃果醪混合发酵对酒体品质的影响,考察了黄酮、多酚、VC和总氨基酸含量等营养成分差异.结果 显示,苹果等其它水果的添加对发酵过程总糖降低有一定延缓效应,但对果酒总酸含量有促进作用.与单一柑橘果酒相比,黄酮含量随着苹果用量的增加而显著增加(p＜0.05),在苹果最大用量(1∶1)酒样中,黄酮含量达到393.43 mg/L.在添加猕猴桃的果酒中VC含量增加显著(p＜0.05),等量柑橘和猕猴桃混酿果酒中VC含量最高,是柑橘果酒的4.38倍.此外,苹果和猕猴桃的添加对果酒中总氨基酸含量也有一定的促进作用,其中柑橘和苹果1∶1用量果酒中总氨基酸含量最高,达到604.11 mg/L,比柑橘果酒高出了9.11％.感官分析结果显示,柑橘猕猴桃2∶1的酒样感官品评分值最高,达到81.73分,最低的为单一柑橘果酒(76.73分).综合各项指标的主成分分析(PCA)结果进一步验证了添加苹果等其它水果对柑橘混酿果酒品质改善和提升方面的显著效果.
介绍了啤酒灌装生产线的计算机控制系统及其特点,给出了用于该系统的恒酒位控制、恒压力控制、加/减速及恒速控制等关键技术的实现方法.在实际应用中,取得了令人满意的控制效果.
考察了半胱氨酸(CYS)添加量和添加时间对酿酒酵母(Saccharomy cerevisiae Y08)合成谷胱甘肽(GSH)的影响.结果表明:在发酵开始时添加半胱氨酸,能够增强菌体合成GSH能力,当添加量达到0.05％时,GSH产量达到最大值(52.28mg·L-1).在发酵稳定期(10h)添加半胱氨酸,胞内GSH含量增加不显著,GSH产量仅提高了10.57％.为降低半胱氨酸对菌体生长的抑制,对酿酒酵母原生质体进行复合诱变,筛选半胱氨酸抗性突变菌株.结果表明:半胱氨酸对半胱氨酸抗性突变菌株的生长抑制作用减轻,抗性菌株能够在含有0.4％半胱氨酸的发酵液中正常生长,GSH产量和胞内GSH含量比未加半胱氨酸时均有显著提高,分别提高了29.28％和29.64％,且性状稳定.
利用优选酵母混菌发酵,是改善葡萄酒品质及增香的有效途径.以赖氨酸培养基、WL培养基和产酶筛选培养基为基础,分析了昌黎4个葡萄园土样中产酶酵母的多样性,结果表明,该地区产酶酵母丰富,50％的产酶酵母能同时产2种或2种以上的酶.对产酶酵母酿造因子耐性分析表明,菌株GY1、M9和J24具有高糖耐性,适合于高糖低醇果酒酿造;菌株GY13和M9具有高酒精耐性,酒精含量为15.000％时活性较强;菌株J24和GY1具有高酸耐性,pH 2.5时具有较高活性;7株菌15℃时具有较高活性.综合分析发现,菌株M9(Torulaspora delbrueckii)同时产β-葡萄糖苷酶、果胶酶和纤维素酶,除酸耐性较差外,具有高糖、高酒精度和低温耐性,在高糖低醇果酒酿造中具有很大应用潜力.