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利用酵母表达体系研究大豆SALI3-2蛋白功能

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-07-01 阅读:878
以含有大豆Sali3-2 cDNA的重组载体为模版,扩增出SALI3-2蛋白及其缺失信号肽的SI cDNA片段,构建酵母表达载体pYES2/S、pYES2/SI以及可表达SALI3-2-His6的pYES2/SH.空载体pYES2/ct和重组载体在转化酿酒酵母INVSC1后得到相应的酵母重组子INV/CK(对照菌)、INV/S、INV/SI和INV/SH.Western blot实验结果表明,SALI3-2蛋白在酵母INVSC1中可被半乳糖诱导表达.对INV/CK、转基因的重组菌INV/S、INV/SI在无胁迫、含1.5mol/L NaCl或山梨醇培养基中的生长情况进行分析.结果表明,大豆SALI3-2蛋白及其缺失多肽SI的表达对无胁迫条件下酵母的生长没有影响,而在NaCl胁迫下可明显提高酵母转化子的耐盐能力.信号肽的缺失使SALI3-2蛋白的耐盐能力有所下降,可见信号肽对该蛋白耐盐功能的发挥有重要作用.另外,SALI3-2蛋白及其缺失多肽SI的表达不能提高酵母重组子的抗渗透能力,表明SALI3-2蛋白对细胞不具有明显的渗透胁迫调节作用.
优质高产啤酒大麦新品种陇啤1号是从匈牙利品种Jaxana中选择优异的变异单株培育而成。在2008—2009年甘肃省多点试验中,陇啤1号折合平均产量8 663.89 kg/hm2,较对照品种甘啤4号和甘啤5号平均增产825.79kg/hm2,增产率达10.54%,居参试品种(系)第1位。该品种为二棱皮大麦,春性,生育期110 d左右,株高70~85 cm,穗长7.7cm左右;穗粒数22粒左右,绝干千粒重43~45 g,绝干蛋白质含量9.7%~11.0%,2.5 mm筛选率在91%以上,浸出物(以干基计)达到81.8%,α-氨基氮为160 mg/100 g,糖化力为355.5 WK,库尔巴哈值为42.4%。具有丰产、抗逆、优质和广适等特点,适宜甘肃省河西、沿黄、引大灌区和中南部雨养旱作区及北方同类大麦种植区种植。
从重庆低海拔地区采得一株虫草,分离得到其无性型菌株.以海绵抑菌圈大小为活性指标,考核了无机盐、碳氮比值、发酵温度及培养基初始pH等因素对其发酵液抑菌活性的影响,筛选出抑菌活性物质的发酵培养基为:NaNO3 0.05%,KCl 0.05%,蔗糖3.0%,蚕蛹粉0.05%.摇瓶最佳发酵条件为:pH 6.5,温度25 ℃,转速250 r/min.在此优化条件下,发酵活性在第6 d最高,对枯草芽孢杆菌的抑菌圈为30.4 mm.用海绵抑菌圈法,测定虫草真菌发酵液对不同供试菌的抑菌活性,对真菌酿酒酵母无抑菌作用,对供试的所有革兰氏阴、阳性细菌都有抑菌活性,且对枯草芽孢杆菌的活性最强,其抑菌圈为(26±4) mm.
本实验以皂土和壳聚糖澄清剂对海红酒澄清效果进行研究,结果表明皂土的澄清效果较好,透光率能达到94%以上,海红酒中黄酮的保留率在84.7%以上,澄清后的海红酒清澈透明,风味更佳.
一种三七白酒,属于保健药酒,特别是三七保健酒;按重量份10:1的比例,将新鲜三七清洗干净浸泡在60°-75°葡萄酒中,浸泡时间为6-12个月,再将浸泡液进行蒸馏提纯后装坛储存6-12个月,再用60°-75°葡萄酒与浸泡液按照重量份8:2的比例调配后装坛储存6-12个月取出过滤即可;对心脑血管硬化和脑梗阻有预防和治疗的奇效,对刀伤、烧伤、烫伤、跌打劳伤的有特效。
啤饲大麦指的是啤酒大麦、饲料大麦和啤饲兼用大麦,云南省历史上仅种植饲料大麦,其用途主要是发展畜牧业、民间普遍采用饲料大麦籽粒发酵烤白酒(烧酒),但在有的贫困山区饲料大麦还是人们的主粮;随着人们对啤饲大麦许多生物学特性和加工特性的逐步认识,结合种植业调整的需要,20世纪80年代以后,云南省啤饲大麦开始向规模化、专用化、产业化和现代化方向快速发展,啤饲大麦在饲用、啤用和白酒酿造等方面的用途不断细化、量化和规范化,农民对发展啤饲大麦的认识也在变化和深化,全省2007年实际种植16.7万hm2,展望"十一五、十二五"的生产前景,云南省啤饲大麦科研生产将进入发展的快车道,全省有望发展到每年种植26.7万~33.3万hm2,成为全国啤饲大麦种植第一大省.

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