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Wilson病基因突变酵母分析系统的建立

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-07-01 阅读:846
[目的]建立一种能够对 Wilson病( WD)基因突变进行分析的方法,为众多的 WD基因突变进行致病性和致病程度的分析.[方法]本试验应用的酿酒酵母是 YPH252,及其 CCC2基因突变型 ccc2酵母细胞.应用酶切方法构建了寡拷贝酵母表达质粒 pMA92.将 ATP7B亚克隆到酵母表达质粒 pMA92上,进行 ccc2酵母的转化和筛选, Western blot分析转化后酵母 ATP7B的表达情况,在铜、铁、色氨酸缺陷型的酵母 SD培养基上培养转化的细胞,进行酵母生长曲线的分析,并进行 Fet3p氧化酶活性的测定.[结果]在 ccc2酵母细胞内表达人的 ATP7B可以弥补 ccc2的运铜功能,使 ccc2酵母细胞在铜、铁及亮氨酸缺陷型培养基上生长良好.[结论] ccc2酵母细胞是研究 ATP7B功能的一种良好的细胞模型,单拷贝 ATP7B的表达就可以代偿 ATP7B的功能缺陷,从而建立了可以对 ATP7B进行分析的酵母分析系统.
以风味导向技术为学术指导思想,研究具有优良酿造功能的微生物的理性组合培养策略,为白酒酿造微生物研究提供新的思路.比较不同酿酒功能微生物的糖化力、蛋白水解能力、产风味及酸、醇、酯的能力,通过理性组合的策略设计了4组不同的酿酒功能微生物组合.组合发酵结果表明酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)C-1、东方伊萨酵母(Issatchenkia orientalis)HH-2和米曲霉(Aspergillus oryzae)P6A-3的组合具有较好的产酯能力,其发酵出的酒风味优于其他组合.
本实用新型公开了一种新型白酒包装盒,包括上盒体和下盒体,上盒体和下盒体之间设有撕裂线,上盒体上还设有铰接座,铰接座上铰接有压板,压板的下端这有正对于撕裂线的切刀,上盒体和下盒体均包括内层盒体和外层盒体,撕裂线处设有位于内层盒体和外层盒体之间的防伪纸,打开时向外拉动压板的上端,这样压板下端的切刀就切入撕裂线内,而后用手扣入压板上端的拉环处,便可以将上盒体和下盒体分离,从而完成打开,当取出酒瓶时,导向筒随着上盒体上相运动,导向块相对于导向槽向下运动,上盒体的继续运动会使得导向槽下端开口的贴纸被导向块划破,而且只要酒瓶从导向筒内脱出就会划破贴纸,从而提高了防伪性能,能有效避免通过更换酒瓶制假酒。
以酿酒葡萄赤霞珠秋梢为试验材料,利用MSX-2F人工模拟霜箱系统模拟自然霜降过程,通过测定秋梢叶片温度,观测植株受冻情况及叶片过冷却点和结冰点温度,确定葡萄秋梢受冻的临界温度.研究结果表明:赤霞珠秋梢叶片全部冻死的最低温度为-6℃;叶片的过冷却点主要分布在-4.5~-3.5℃之间;赤霞珠秋梢轻霜冻温度指标为-2℃,重霜冻温度指标为-4℃.
用大肠杆菌K12D31免疫斜纹夜蛾六龄幼虫,12h后收集血淋巴并通过高温处理制成粗提液.SDS-PAGE电泳结果表明: 诱导后粗提液含有3条分别为43.5、15.0、4.0kD的特异性条带.诱导产生的抗菌物质在酸性、高温和常温等条件下保持稳定.抗菌谱测定结果表明,诱导产生的抗菌物质对猪霍乱沙门氏菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌等革兰氏阴性和阳性菌有抑制作用,而且对白色念珠球菌、酿酒酵母也有抑制作用.
RAD6最初是在酿酒酵母(S.cerevisiae)中发现的一种具有催化H2B单泛素化活性的泛素交联酶(E2),它具有一个UBCc结构域.早些年,人们对泛素系统在DNA损伤修复(DNA-damage repair,DDR)中的作用了解非常有限.近年来,泛素在DNA损伤修复中蛋白质招募过程中扮演的广泛角色逐渐被人们所认识.RAD6高度保守,能与多个泛素连接酶相互作用,在DDR中发挥重要作用.

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