人组织因子途径抑制因子在毕赤酵母中的表达与纯化

目的 利用毕赤酵母高效表达人组织因子途径抑制因子(TFPI).方法 利用基因定点突变技术对人TFPI cDNA特定序列进行定点突变(同义突变).将获得的突变体及野生型cDNA分别插入表达载体pPic9中,转化酵母宿主菌GS115和KM71,用0.5%的甲醇诱导重组蛋白表达.细胞培养上清经超滤浓缩后,依次用DEAE-sepharose Fast Flow、Heparin-sepharose CL6B及 Sephadex G-75柱层析分离纯化得到重组蛋白,分别采用凝胶扫描成像定量分析和底物显色法测定重组蛋白的表达量和活性.结果 凝胶扫描成像定量分析显示,同义突变体的表达量(1 mg/L)显著高于天然型(0.1 mg/L).活性测定表明GS115重组菌在诱导表达12 h后即可于培养上清中检测到TFPI活性,36 h达峰值;而KM71重组菌诱导表达24 h后才开始于培养上清中检测到TFPI活性,72 h达峰值.两个菌株中突变体mTFPI-pPic9转化子的表达量均显著高于TFPI-pPic9转化子.重组蛋白相对分子质量约为42 000.结论 对TFPI-cDNA特定序列进行同义突变后能显著提高重组蛋白在毕赤酵母细胞中的表达,且显著高于在酿酒酵母和昆虫细胞的表达;重组蛋白具有良好的生物活性.因此,利用毕赤酵母表达TFPI是一种较好的选择.
在深入探索、研究我国啤酒废水的各种处理工艺的基础上,对五种具有代表性的、相对较为成熟的生物处理工艺进行分析和比较,并提出了综合评价治理设施的评价因素集、评价指标和评价方法.为啤酒废水治理的工艺选择提供了科学依据.
大麦β-淀粉酶活性是啤酒大麦的一个重要品质性状,它与麦芽糖化力存在着密切关系.β-淀粉酶活性不但受品种本身遗传因素控制,很大程度上还取决于环境和栽培措施.本文还阐述了大麦β-淀粉酶的酶学特性及其遗传和育种改良.
本发明公开了一种用水果酿造白酒的工艺，第一步，将优良的水果去梗洗净；第二步，将水果去皮打碎榨汁，然后皮、榨、核、汁分离；第三步，将水果汁过滤后冷藏；第四步，把冷藏的水果汁增温进行第一次发酵；第五步，对第四步得到的果汁进行第二次发酵；第六步，对第五步得到的果酒进行第一次蒸馏(粗溜)；第七步，对第六步得到的白酒进行第二次蒸馏(中溜)；第八步，对第七步得到的白酒进行第三次蒸馏(细溜)。本发明的有益效果：用水果取代了粮食，不使用任何酒曲、添加剂和香料，食用安全，入口舒适，口味纯正，无污染，原料利用率高。
本发明设计一种降低和改善高度白酒口感的方法，其特征在于：在高度白酒中加入白糖。所加入的白糖占重量的百分比30%以下。本发明的优点是可以利用所加的白糖降低高度白酒中酒精对人体肝脏的伤害，降低人体醉酒的危险。
以马尾松松针、蜂蜜、糯米为原料,经优选工艺条件发酵制得口味纯正、风味独特的松针蜜酒.