厚壳贻贝足丝盘黏附蛋白mcofp-3的重组真核表达

厚壳贻贝(Mytilus coruscus)黏附蛋白分子mcofp-3(M.coruscus foot protein-3)主要分布于贻贝足丝盘,胎贝在水环境下的黏附过程中起到关键作用,但因其难溶于水且在贻贝足丝盘中含量极低,故妨碍了对其进行深入研究.为建立厚壳贻贝足丝蛋白mcofp-3的真核表达体系,并获得足够的mcofp-3黏附蛋白进行后续研究,采用酵母表达体系对mcofp-3进行了重组表达.通过PCR方法克隆厚壳贻贝的moofp-3基因,构建mcofp-3的酵母真核表达载体pVT102U/α/mcofp-3,鉴定结果表明,重组表达质粒pVT102U/α/mcofp-3由真核载体pVT102U/α和mcofp-3的成熟肽DNA片段组成,插入的mcofp-3成熟肤DNA片段与预期序列完全一致;采用LiAC转化法将重组表达质粒转化到S78酿酒酵母中,经过RT-PCR分析以及1.0%的琼脂糖凝胶电泳检测,结果表明,重组的mcofp-3得到了成功的转录;发酵菌液经阳离子交换柱及高效液相色谱分离,以及TrisTricine-SDS-PAGE检测,结果表明,重组的厚壳贻贝黏附蛋白分子mcofp-3得到了成功表达,表达产物分子量约为6 kD,与预期分子量一致.
本发明公开了一种白酒的过滤澄清工艺，涉及酒加工技术领域。所述工艺为：先向白酒中加入硅藻土，经搅拌、静置、离心、去除沉淀，得粗滤酒，再向粗滤酒中加入壳聚糖溶液混合搅拌均匀，超声波处理后，加入活性吸附剂，经搅拌、静置、离心、过滤，即得；所述活性吸附剂制备方法为：将凹凸棒土和硅酸钠研磨后，高温煅烧，并与虾壳粉混合研磨后制粒，最后将颗粒加入氢氧化钠溶液中浸泡处理，即得。本发明能针对性的去除酒中的钙离子、镁离子和铁离子，有效防止了产品固形物含量超标和腥味的出现，提高了产品的品质。
目的:以整合型载体pRS303K为框架,以来源于拟南芥的4-香豆酰辅酶A连接酶基因(4cl)和巨峰葡萄的白藜芦醇合酶基因(rs)为目标基因,采用一步等温法构建了表达白藜芦醇的整合型酵母表达载体pRS303K-T4C-TRC.方法:采用LiAc/SS carrier DNMPEG转化法把表达载体成功转化酿酒酵母工业型菌株EC1118,经筛选和PCR鉴定获得酵母工程菌株EC 1118-303K-T4C-TRC.酵母工程菌株采用添加和不添加抗生素的发酵培养.结果:在培养基添加抗生素和不加抗生素的发酵液中白藜芦醇的含量分别为3.4110 mg/L和3.4710 mg/L,两者差异不显著.结论:两个关键酶基因成功整合到酵母的染色体基因组中并得到表达,工程菌株在传代中不受选择压力影响,稳定组合表达白藜芦醇.
针对食品生命周期内产生的资源、能源消耗以及对环境的影响,将生命周期评价引入食品加工领域,从目标与范围定义、清单分析、影响评价和改善评价4个步骤初步构建了食品LCA方法体系.分析了中国开展食品LCA存在的问题以及相应的解决途径.以啤酒酿造过程为案例进行了评价研究.评价结果显示,该过程中各主要环境影响因子影响潜值依次为:富营养化(0.061),工业烟尘和粉尘(0.015),固体废弃物(0.003),据此可分别建立有效的废水处理设施,改进物料粉碎方式,回收利用废硅藻土来相应减少环境影响.研究表明,开展食品LCA可以为提高食品环境性能提供有效的数据支持,对中国食品工业实现可持续发展具有重要意义.
研究了以脱胚玉米粉为原料生产符合酵母生长所需全部营养的啤酒专用玉米糖浆的最优工艺,采用2种不同的液化酶液化,添加2种不同麦芽与蛋白酶进行蛋白质休止,然后糖化、过滤、精制,比较所得各种糖浆的各项指标.结果表明,选用脱胚玉米粉,采用耐高温液化酶高温液化,灭酶冷却后,通过添加一定量的麦芽和蛋白酶,进行蛋白质水解,再添加少量糖化酶,然后过滤、精制,所得的玉米糖浆气味清香,颜色淡黄透明,其α-氨基氮含量和总氮含量均与麦汁接近,特别是核苷酸类物质,含量较高,总多酚含量较低,糖谱成分合理,基本上可以满足酵母生长所需的全部营养,只是糖浆中的发泡蛋白含量不足.
为探讨不同肥料组合对酿酒葡萄生长和结果的影响，以4年生赤霞珠葡萄为材料，分析了不同肥料处理下葡萄新梢的生长变化和果实品质。结果表明：在新梢摘心时，各配方施肥组合处理的新梢粗度和叶面积均大于CK，而新梢长度却低于CK。在果实成熟后，一些配方施肥组合可以显著影响果实穗重、粒重和果粒纵径等果实外在品质，但果实横径和果皮花色苷含量在不同处理间差异不显著。一些配方施肥组合也可以显著影响可溶性固形物、出汁率、总酸、还原糖和单宁等果实内在品质，但果实中VC含量在不同处理间差异不显著。总体看来，T6处理（即萌芽期株施尿素27 g；膨果期株施尿素33 g、磷酸一铵33 g和硫酸钾32 g；转色期株施磷酸一铵27 g和硫酸钾58 g）对赤霞珠葡萄新梢生长和果实品质的改善有更好的作用。