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普通小麦TaSEC14p-5基因的克隆及表达分析

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-07-02 阅读:911
磷脂酰肌醇转运蛋白Sec14是最先在酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中发现的磷脂酰肌醇转运蛋白,含有一个典型的SEC14保守结构域.S0ec14p磷脂酰肌醇转运蛋白广泛存在于真核生物细胞中,并参与膜运输途径、质膜发育、脂肪酸代谢、根毛的生长等生命活动,但未见此蛋白在作物逆境胁迫的有关报道.为研究Sec14p基因在小麦(Triticum aestivum)发育及逆境胁迫中的功能,本研究采用电子克隆方法从小麦京花9号中得到一个Sec14p基因,命名为TaSEC14p-5 (GenBank登录号:KU639968).氨基酸序列分析表明,该基因ORF全长为984 bp,编码327个氨基酸,相对分子质量为37.1 kD,理论等电点为7.70.在植物中该蛋白有典型的SEC14类基因家族保守域SEC14和一个CRAL_TRIO_N结构域.进化和聚类分析表明,小麦TaSEC14p-5基因与粗山羊草(Aegilops tauschii)磷脂酰肌醇转运蛋白AeSEC14p基因和水稻(Oryza sativa)磷脂酰肌醇转运蛋白Os02g0200000基因亲缘关系较近,蛋白相似度分别为96.45%和88.38%.采用qRT-PCR技术,对小麦孕穗期不同组织和不同非生物胁迫幼苗进行表达分析.发现该基因在根、茎、叶、颖壳、雄蕊和种子中均有表达,且在茎中表达量较高,雄蕊次之,根最低;该基因受高盐的强烈诱导,同时也受到脱落酸(abscisic acid,ABA) (200μmol/L)、干旱(PEG6000)和低温(4℃)不同程度的胁迫诱导.TaSEC14p-5在NaC1、ABA、PEG和4 ℃四种不同胁迫处理下,总体趋势为先上升后下降.结果推测,TaSEC14p-5基因可能参与了NaC1、ABA、PEG6000和4℃等不同程度的非生物胁迫处理,为进一步改良小麦抗逆性等分子机理研究提供了新的依据.
将酿酒酵母、假丝酵母、嗜热链球菌分别接种到含不同硒浓度的培养液中进行培养,测定各菌株的生物量及生物硒含量,筛选出生物硒合成能力强的菌株,并将其两两混合、最后完全混合培养,得到生物硒合成能力强的混合菌株。结果表明,3种菌株生物硒合成能力由弱到强分别为酿酒酵母(11.7533μg/mL)、嗜热链球菌(11.9890μg/mL)、假丝酵母(12.8973μg/mL);嗜热链球菌-酿酒酵母混合制备的复合菌株生物硒合成能力最强,生物硒含量最高达到15.8864μg/mL。
白酒中不挥发性有机酸可能是白酒呈酸味的重要化合物,为明晰白酒原酒中不挥发性有机酸的组成与含量,采用N,O-双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺(N,O-bis(trimethylsilyl) trifluoroacetamide,BSTFA)衍生化结合气相色谱-质谱(GC-MS)研究白酒中不挥发有机酸,共检测到27种有机酸.通过定量这些有机酸在7种香型白酒原酒中的分布,发现羟基酸的种类最多,且总浓度最高.在检测的所有有机酸中乳酸含量最高,在几百mg/L至几个g/L之间,远远高于其他不挥发有机酸.大多数不挥发有机酸在酱香型、芝麻香型白酒中的含量较高,在清香和凤香白酒中的含量较低.
一种白酒的光谱图测定方法及差异化分析方法,涉及白酒检测领域。白酒的光谱图测定方法包括:将白酒样品依次进行脱氧处理和冷冻,获得待测样品。将待测样品经荧光分光光度计扫描,获得光谱图,光谱图包括三维荧光光谱图、发射光光谱图以及激发光光谱图。白酒的光谱图测定方法采用低温冷冻技术和脱氧处理的方法对白酒样品进行稳态化处理,减少溶氧消光作用,防止信号干扰,明显提高了荧光强度。利用上述白酒的光谱图测定方法,便于进行后续分析,获得白酒样品的差异性分析结果。
本文介绍了Modbus plus总线、INTTERBUS及MODBUS现场总线的特点,重点阐述了在整条啤酒灌装生产线采用Modbus plus总线、INTTERBUS及Modbus现场总线相结合的控制系统的设计与应用.
本发明公开了一种新型固态白酒酿造方法,包括如下步骤:a.分别酿造至少二种单粮原酒,即分别煮粮、分别发酵、分别蒸馏、分别窖存;b.将上述分别酿造的至少二种单粮原酒调配成所需白酒。一种新型固态白酒,用如下重量份的60%vol的单粮原酒调配而成:高粱原酒20?35%、玉米原酒5?10%、大米原酒20?30%、小麦原酒10?20%、糯谷原酒15?25%、豌豆原酒4?10%、甜荞原酒5?10%、黄豆原酒1?5%。

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