禾谷镰孢碳源代谢调控因子FgCreA的功能

[目的]敲除禾谷镰孢(Fusarium gramiearum)中碳源代谢调控因子FgCreA,并对其营养生长、有性生殖和致病力等方面进行研究,为研究禾谷镰孢中碳源代谢机制提供依据.[方法]根据酵母数据库SGD和NCBI数据库中的序列,利用酿酒酵母中碳源代谢调控因子Migl确定禾谷镰孢中的碳源调控因子FgCreA;在NCBI数据库中检索其他物种中碳源代谢调控蛋白,使用ClustalW2软件进行多重序列比对,并用MEGA5软件构建系统进化树,同时在InterProScan网站上预测其蛋白结构域;在NCBI数据库中检索与禾谷镰孢碳源吸收相关的结构基因和真菌毒素DON生物合成的相关基因,调取起始密码子上游1 000 bp的片段,预测FgCREA基因结合位点位置;用Primer5软件设计引物,利用Split-PCR和PEG介导原生质体转化的方法进行基因敲除,并通过PCR和Southernblot验证获得FgCREA基因敲除突变体Fgcrea.根据突变体Fgcrea营养生长、有性生殖和致病力等方面的变化分析FgCREA的功能.[结果]通过生物信息学方法,明确禾谷镰孢中只有一个碳源代谢调控因子基因FgCREA (FGSG_09715),氨基酸序列416 aa,共包含两个保守的C2H2锌指结构区域.FgCreA同源蛋白在各类真菌中均存在一定程度的同源性,具有较高的保守性.禾谷镰孢碳源吸收相关结构基因(XYL2、ARA1、ICL1、PG1、SUC2)和真菌毒素DON生物合成相关基因(TRI1、TRI3、TRI4、TRI5、RI6、TRI7、TRI8、TRI10、TRI12、TRI101)启动子区均含有FgCREA DNA结合位点.采用Split-PCR技术和PEG介导的原生质体转化,通过PCR和Southern blot获得并验证了两个FgCREA基因敲除突变体.表型观察发现,突变体Fgcrea的生长速度与野生型相比下降90％;分生孢子形态正常,但产孢量与野生型相比降低88％;有性生殖阶段,突变体Fgcrea可以产生正常的子囊壳、子囊和子囊孢子,但需要比野生型长20-28 d;突变体Fgcrea对钠盐较敏感,侵染小麦穗不发病.[结论]获得禾谷镰孢碳代谢调控因子FgCreA敲除突变体,明确FgCreA参与营养生长和有性生殖,并能够影响致病过程.但是否影响相关结构基因的转录水平和DON生物合成仍需进一步验证.
本发明涉及一种酿酒领域的一种白酒的制作方法,现有的黄酒糟烧(白酒)制作是将压榨后的单一黄酒糟经蒸馏取酒。本发明的特征是将黄酒糟或黄酒醪与淀粉质原料、酶制剂、蒸馏后的酒糟、酒醅、酵母菌等一起进行液态或固态发酵。该方法具有双轮底增香、香醅串蒸、出酒率高及产量大、酒质佳等优点。
[目的]探究树莓果酒发酵的最佳工艺参数.[方法]以树莓全汁为原料,新鲜浆果中分离的树莓果酒最佳酿酒酵母为发酵菌种,探讨发酵温度、pH、初糖浓度及酵母接种量对树莓果酒品质的影响.[结果]试验表明,这4个因素对树莓果酒发酵均有不同程度的影响,大小次序为初糖浓度、酵母接种量、发酵温度、pH,当发酵温度26℃、酵母接种量8％、pH 3.7、初糖浓度23％时得到的果酒品质最佳,其总酸9.23 g/L,残糖3.48g/L,酒精度11.6％ vol,具有鲜亮的宝石红色,澄清透亮,果香浓郁,酒体丰满,口味纯正.[结论]在该研究得出的工艺条件下可获得优质高档的树莓果酒,为树莓产业的发展奠定基础.
应用八种苏木精染色液和三种伊红染色液配制法,对组织石蜡切片进行了染色比较试验,试验结果表明,Harris苏木精液、Mayer苏木精液、Gill半氧化苏木精液、碘化钠氧化苏木精液和1%伊红复制液、1%伊红酒精液的染色性能稳定,能长期使用,氧化膜较薄,结晶析出较少,配制方法简便,染色效果良好.
中国白酒历经几千年仍被人们所青睐,这是白酒文化传承和健康价值的体现.白酒的发展方向是健康.本文对白酒中健康成分及其功效进行综述,为“适量饮酒,有益健康”的概念提供科学依据.首次提出健康白酒应该通过“内寻外加,自然强化”来实现,即一方面通过系统分析发现白酒中对人体有益的成分,并通过传统发酵过程的创新增加这些成分的含量;另一方面向白酒中合理添加其它对人体有益的成分.
本发明提供了一种复合型白酒，这样酿制而成：采摘成熟新鲜的水果，分选、清洗、除杂、破碎，得水果浆汁；发酵；发酵汁液的糖度降至4%以下时，蒸馏，得第一水果蒸馏原酒，掐头去尾，得第一水果蒸馏原酒酒心，再蒸馏第一水果蒸馏原酒酒心，重复蒸馏和掐头去尾的工序，得水果蒸馏酒酒心；静置陈放老熟至少6个月；混合老熟好的水果蒸馏酒酒心和白酒原浆酒，得混合酒，调节该混合酒的酒精度，过滤，得复合型白酒。该复合型白酒的pH值接近中性，具有无限降度，无失光浑浊，且酒香丰满怡人、口味柔和细致等特点，非常符合当今新生代的消费群体求新求异的消费需求。