缺刻缘绿藻二酰甘油酰基转移酶2(DGAT2)的基因特性与功能鉴定

酰基-CoA—二酰甘油酰基转移酶(DGAT)是微藻等植物三酰甘油(TAG)合成过程中的关键酶.为了解析缺刻缘绿藻TAG合成代谢的途径,在该藻转录组测序数据库中,通过同源搜索,发现了1个编码DGAT2的cDNA全长序列.该序列长1 997 bp,其中5'-非翻译区(UTR)长44 bp,3 '-UTR长897 bp,开放阅读框(ORF)长1 056 bp,编码1个含有351个氨基酸的蛋白质,预测的分子量为39.43 ku,等电点为9.46.基于缺刻缘绿藻和其他物种相应的DGAT基因编码蛋白序列所构建的Neighbor-Joining(NJ)系统进化树,结果表明该基因与DGAT2聚成一支,显著不同于DGAT1和DGAT3.氨基酸序列比对发现,该基因编码产物含有DGAT2所具有的HPHG这4个氨基酸所组成的高度保守特征序列.因此,将该基因命名为MiDGAT2.将它的cDNA与其DNA序列进行比较后发现,MiDGAT2含有6个内含子,其剪接位点均符合“GT-AG”规则.为进一步了解其功能,利用反转录PCR克隆了该基因的ORF序列,然后将其亚克隆到表达载体pYES2中,成功地构建了重组表达质粒pY-MiDGAT2.通过电穿孔法将该重组质粒转入酿酒酵母TAG合成缺陷株H1246中,经筛选与序列验证得到含有重组质粒pY-MiDGAT2的酵母转化株.酵母转化株在用SC培养基并加入半乳糖诱导表达培养后,其脂类的薄层色谱分析结果表明,所转的MiDGAT2基因能使酵母转化株恢复TAG合成的能力,从而证实了MiDGAT2基因具有DGAT的功能；利用荧光染料Bodipy对酵母细胞的染色结果显示,MiDGAT2基因能使酵母转化株的细胞重现油滴,尽管重建的油滴大小明显比野生型酵母的小.
用RAPD技术分析新疆7个啤酒花(Humulus lupulus L.)的天然居群遗传多样性及群体间的遗传分化,12个随机引物共检测到121个可重复的位点,其中多态位点119个,占总位点的98.35%.由Shannon表型多样性指数和Nei基因多样性指数估计,居群内遗传分化百分比分别为63.55%和65.65%,表明啤酒花种内的遗传变异主要存在于群体内.分析认为,新疆境内啤酒花自然居群的遗传多样性很丰富,居群间产生了一定的分化.啤酒花居群的基因流Nm=1.0037,相对有限的基因流可能在居群遗传分化的维持中起着作用.
本文以新疆和青海葡萄产区的5株不同酿酒酵母(B-4、D-1、D-2、Q-42-2、Q-50-2)为试材,在分离纯化的基础上,对这5株酵母进行不同梯度酒精度、糖度、酸度和SO2的耐受能力测定.结果表明,菌株Q-42-2和Q-50-2的综合耐受能力较强,他们能在含糖量＞250g/L、SO2含量＞400mg/L、酒度＞15%、酸度pH＜2.0的发酵基质中发酵.证明Q-42-2和Q-50-2酵母菌株具有良好的耐受性.
通过田间试验和室内分析,研究了宁夏贺兰山东麓不同氮肥施用量对风沙土3年生酿酒葡萄赤霞珠生长与产量、品质的影响及施氮肥的经济效益.结果表明:供试土壤有机质肥力、速效氮和速效磷含量较低,而氮素是酿酒葡萄生长发育的决定性指标,对酿酒葡萄生长、产量及品质均有显著影响,但施氮量超过450 kg/hm2后抑制新梢生长,产量反而下降.经肥效方程计算得出风沙土3年生酿酒葡萄最高产量施氮量为332.5 kg/hm2,最佳经济效益施氮量为305.33 kg/hm2.
本文介绍了葡萄酒和果酒中甲醇的主要来源和危害,国内外对果酒中甲醇的限量规定;阐述了降低葡萄酒、果露酒中甲醇含量的研究现状.提出通过应用健康原料和预处理技术,选用恰当的果胶酶种类并在使用中进行纯化与活性抑制技术,选择良好的酒基和蒸馏措施,均能降低果露酒中甲醇含量.
本实用新型涉及白酒生产领域，公开了一种露天罐区用白酒储罐。该露天罐区用白酒储罐，包括罐体，其特征在于，在罐体的顶部设置有防晒水喷淋环，在罐体的侧壁底部设置有防晒水回收槽，所述防晒水回收槽和防晒水喷淋环之间设置有循环泵。本实用新型在罐体上设计防晒水喷淋与回收的装置，使露天罐区用白酒储罐定型化、成套化、规范化；防晒水循环利用，既改善罐区的操作环境，又减少水资源的浪费，能够达到节能减排的目的。