橡胶树白粉病菌OhPbs2的克隆及功能分析

[目的]Pbs2是MAPK信号途径HOG-MAPK通路的重要成员之一,在植物病原菌渗透压调节方面发挥着重要作用.橡胶树白粉病菌(Oidium heveae)是专性寄生菌,论文借助橡胶树炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides),研究橡胶树白粉病菌OhPbs2的功能.[方法]采用同源克隆方法,分别以橡胶树白粉病菌基因组DNA和cDNA为模板,PCR扩增OhPbs2;利用生物信息学分析该基因的结构域,对该基因和其他真菌的7个同源蛋白序列进行系统进化分析,并利用MEGA6中最大简约法构建系统进化树来进一步分析鉴定该基因;利用同源重组和原生质体转化技术,将OhPbs2转化到缺失Pbs2的橡胶树炭疽菌突变体ΔCgPbs2中;在PDA+1.5 mol·L-1山梨醇的平板上筛选转化子,同时提取转化子的基因组作为模板,用橡胶树白粉病菌OhPbs2的引物对进行PCR鉴定,选择正确的转化子ΔCgPbs2+OhPbs2进行后续表型测定;在不同培养条件下,比较ΔCgPbs2、ΔCgPbs2+OhPbs2和野生型菌株生长状态,并在橡胶树叶片接菌检测3个菌株致病力.[结果]OhPbs2基因序列全长1927 bp,cDNA序列全长1860 bp,含有一个内含子,编码一个619个氨基酸的蛋白;生物信息学分析表明该蛋白具有与CgPbs2相同的S_TKc功能域,构建系统进化树发现橡胶树白粉病菌Pbs2蛋白与烟曲霉(Aspergillus fumigatus)Pbs2蛋白亲缘关系最近,相似度为55%,与橡胶树炭疽病菌的相似度为49%,与粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)、稻瘟菌(Magnaporthe oryzae)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、禾谷镰孢(Fusarium graminearum)的Pbs2蛋白具有较近的亲缘关系,相似度分别为54%、53%、53%、50%;ΔCgPbs2+OhPbs2菌株能在PDA+1.5 mol·L-1山梨醇培养基上长出白色菌落,ΔCgPbs2菌株不能生长,并且测序结果显示OhPbs2已成功转入ΔCgPbs2;ΔCgPbs2+OhPbs2在MM培养基上菌落呈白色,气生菌丝较短,不同于wild type菌株.在含有不同浓度NaCl、山梨醇、SDS、H2O2及咯菌腈的MM培养基上,ΔCgPbs2、ΔCgPbs2+OhPbs2和wild type菌株随着浓度增加,菌落生长速度逐渐降低,OhPbs2不仅能恢复橡胶树炭疽菌菌株耐渗透压尤其耐受山梨醇的能力以及对咯菌腈的敏感性,甚至具有增强的能力,OhPbs2互补改变了橡胶树炭疽病菌颜色,抑制了气生菌丝生长;CgPbs2可能参与了橡胶树炭疽病菌致病性,但OhPbs2互补没有恢复其致病性.[结论]OhPbs2可能参与调控病菌的营养生长、氧化应激反应、渗透压响应及细胞壁形成等,并能增强橡胶树炭疽病菌相应功能,但与CgPbs2调控病菌致病力的机制可能存在不同.
以ABR反应器为基础,采用笼状填料,增加了缺氧与好氧段,设计了新型的ABR；以啤酒废水为处理对象,考察了新型反应器的启动过程,研究了新型反应器对废水COD的去除效果,分析了HRT、有机容积负荷对COD去除的影响,探讨了新型反应器处理过程中的pH变化及其原因,阐述了笼状填料截留和微生物的附着生长是出水SS较低的原因,出水氨氮浓度较低是增设的缺氧段和好氧段共同作用的结果.实验结果表明,其COD去除效率达96％,有机容积负荷约0.647～1.745 kg/(m3·d)；当进水量为50 L/d时,其出水水质达到啤酒废水排放标准.
本发明为一种白酒厂窖池工艺参数动态监测系统。监测装置1通过通讯接口4与监测器5的1/0接口6连接,1/0接口6与模拟输入模块7和水份仪8连接,模拟输入模块7与温度传感器10、氧传感器11、二氧化碳传感器14、液位传感器15、溶解氧传感器16、黄水酸度采样器17连接,水份仪8与酒醅水传感器9连接,监测装置1的计算机与输入、输出外设连接,传感器安装在白酒窑池内的监测点位。本发明结构简单,可对白酒酿酒工艺过程动态监测从而指导白酒生产。
白酒包装盒语音提示系统，它包括电源、光控开关、语音控制板和扬声器；所述电源的正极直接通过导线和语音控制板相连接，所述电源的负极通过导线和光控开关的输入端相连接，该光控开关的输出端通过导线与语音控制板相连接；所述语音控制板通过导线与扬声器相连接。本实用新型产品能自动对购买者讲解所购白酒的品质、产地和使用方法等；从而减少了销售的人力成本；也提高了购买者对产品的可信度。
将酿酒酵母、假丝酵母、嗜热链球菌分别接种到含不同硒浓度的培养液中进行培养，测定各菌株的生物量及生物硒含量，筛选出生物硒合成能力强的菌株，并将其两两混合、最后完全混合培养，得到生物硒合成能力强的混合菌株。结果表明，3种菌株生物硒合成能力由弱到强分别为酿酒酵母（11．7533μg/mL）、嗜热链球菌（11．9890μg/mL）、假丝酵母（12．8973μg/mL）；嗜热链球菌-酿酒酵母混合制备的复合菌株生物硒合成能力最强，生物硒含量最高达到15．8864μg/mL。
纯生啤酒的泡持随着货架时间的延长会逐渐衰减,严重影响啤酒的外观质量.大量的文献资料证实,纯生啤酒泡持性的下降是由酒液中存在的蛋白酶A造成的.通过对成品酒泡持性的跟踪测定,重点讨论了发酵及啤酒过滤过程控制对泡持衰减趋势的影响.