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乙醇脱氢酶Ⅰ基因敲除的酿酒酵母重组菌构建的初步研究

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-05-11 阅读:220
本实验根据酿酒酵母乙醇代谢途径,构建一株低乙醇产量的酿酒酵母基因工程菌株,以满足人们对低醇啤酒的需要.利用抗性基因筛选基因敲除突变体的方法,通过引物L1和L2扩增潮霉素B基因(两翼与酿酒酵母同源),按常规醋酸锂法转化酵母细胞后,筛选标记与酵母adh Ⅰ基因发生同源重组,得到一株ADH Ⅰ酶活性降低的工程菌株.发酵实验结果表明,转化菌株乙醇含量平均值为1.8%(V/V),较原始菌株低了65%.说明转化菌株体内乙醇生成途径受到干扰.
根据中国北方376个气象台站1981-2010年逐日气象资料,结合酿酒葡萄取样化验结果和其他区划指标,采用无霜期、≥10℃积温、采收期降水量、土壤类型和坡向等生态因子,综合运用集优法和GIS技术对中国北方干白酒用葡萄进行精细化生态区划,制作了中国北方干白酒用葡萄生态区划图,给出优质干白酒用葡萄生态区的分布范围,指出各区域发展酿酒葡萄的限制性生态因子和生产建议,为中国北方干白葡萄区域化发展和酿酒葡萄基地优质品种选择提供理论参考.
本发明公开了一种可提高白酒风味的醋酸菌(Acetobacter?sp.)HJB-012,属于白酒酿造技术领域。该菌株已于2012年12月12日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC?NO.6982。HJB-012菌株为异型厌氧发酵,既产乙酸又产乳酸,具有良好的产酸产酯性能,可有效改善白酒品质、提高白酒风味。菌株HJB-012应用于白酒酿造中,为白酒酿造补充了重要功能菌,进行强化制酒,可为现代自动化制酒工艺的改进提供理论依据和技术支持,为推动传统产业的升级提供技术指导,该技术的推广对老白干香型及其它香型白酒的生产也具有非常重要的实践意义。
本发明公开了一种功能性白酒及其制备方法。所述功能性白酒中微量元素锗的含量≥1μg/L,硒的含量≥1μg/L,所述功能性白酒是由太一余粮石单独制成、无花果嫩枝叶与灵芝两种原料制成或者太一余粮石、无花果嫩枝叶和灵芝三种原料制成。它既保持了白酒清澈透明、无色醇香的特征,又含有多种微量元素,具备治疗、保健功能,可预防多种疾病的发生,更具有社会效益、经济价值和市场利润。
实验研究酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)原生质体的分离再生及再生菌株的构建,以蜗牛酶、纤维素酶、溶壁酶的去壁效果最好,而新生酶、几丁质酶的去壁效果较差.2种以上的酶液混合使用能提高去壁效果.酶解液浓度在0.1%~2%内原生质体释放量随酶解液的浓度升高而上升.酶解液pH值在5.0~7.0时原生质体的产量较高,渗透压稳定剂以柠檬酸-磷酸缓冲液(pH6.0,内含0.8mol/L山梨糖醇)处理原生质体释放量最高.而培养基对原生质体释放量的影响不明显.通过原生质体融合技术,获得融合子HG112,对HG112进行以葡萄糖为基质的发酵试验,结果显示该融合子乙醇含量达7.9%(体积比),比亲本QT提高49.7%,该技术可用于筛选优良菌株.
在综述西北地区现代气候变化基本特征的基础上,重点揭示了主要经济作物棉花、胡麻、冬油菜和特色作物酿酒葡萄、苹果5种作物的生长发育、产量与品质等对现代气候暖干化的响应特征,并提出应对气候暖干化的技术措施,为农业生产提供服务.

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