响应面法优化蛹虫草固态发酵产物虫草素与腺苷综合提取工艺

以大米、啤酒糟共培养的蛹虫草固态发酵产物为原料,采用浸提法综合提取虫草素与腺苷,并利用响应面法优化提取条件.通过单因素试验考察提取时间、乙醇溶液体积分数、液料比和提取温度对综合提取虫草素与腺苷得率的影响.在单因素试验基础上,利用Box-Behnken试验设计,对浸提工艺中各影响因素进行优化.结果表明,浸提法综合提取虫草素与腺苷的最适工艺条件为纯水提取、提取温度45℃、液料比22∶1(mL/g)、提取时间87 min,在该条件下虫草素与腺苷的综合得率为2.491‰,与模型理论预测值相近,说明该模型回归性良好,试验的拟合程度高.蛹虫草固态发酵产物中富含虫草素、腺苷,具有一定开发价值.
基于絮凝素FL01基因片段为锚定序列,构建以诱导型GAL1启动子介导的表达栽体YEP-GMPFAK,并实现以半乳糖为诱导剂,β-1,3-1,4-葡聚糖酶在酿酒酵母表面的展示表达.酵母转化子发酵实验表明,在pH6.0、50℃培养条件下,经2%半乳糖诱导24 h,表面展示酶活达到最大值322.83 U/g细胞干重.酶学性质测定表明,展示表达的β-1,3-1,4-葡聚糖酶具有良好的热稳定性.
为获得中国本土优良酵母,提高葡萄酒感官特性,通过对采自新疆鄯善地区、宁夏广夏三基地的40株野生酵母菌株进行实验室酿酒实验,筛选到两株高产甘油、低产H2S的葡萄酒优良酵母菌株H02、E22.分别于2010、201 1年连续2a对这2株菌进行了10～20 L酒厂发酵实验并研究其酿酒特性.酒样理化指标结果符合国家标准GB 15037-2006《葡萄酒》要求,感官品尝分析结果与对照商业酵母VL1、RC212、C2C的差异性不显著(P＞0.05),感官品质相当,筛选出的野生酵母菌株有着优良的酿酒特性.
[目的]选育酿造低甲醇高总酯蒸馏酒的酿酒酵母菌株.[方法]利用原生质体融合技术,对低甲醇酿酒酵母与高总酯酿酒酵母进行融合.[结果]选育出的酵母菌种酿造蒸馏酒中的相对甲醇含量为145.31 mg/L,比初始低甲醇菌株降低了22.8％,总酯含量为0.79g／L,增加了83.7％.[结论]原生质体融合法成功选育出低甲醇高总酯的酿酒酵母菌株.
针对生啤酒膜滤除菌技术,采用无机陶瓷膜,对膜孔径的选择、膜器结构优化、膜滤运行过程强化等方面进行了系统的试验研究,提出了一套新型高效的膜器结构与工艺设计的依据.
为了构建对啤酒花潜隐病毒(HpLV)和啤酒花潜隐类病毒(HpLVd)有抗性的RNAi载体,本研究通过序列比对选取HpLV外壳蛋白基因致病区202 bp和HpLVd 155 bp的保守序列作为干扰序列,以干扰载体pUCCRNAi为基础,成功构建出针对HpLV和HpLVd的双价RNAi载体,通过特异性酶切位点将构建成功的RNAi载体的功能区域连接在植物表达载体pCAMBIA2300-35S-OCS上,并利用农杆菌介导法将目的基因导入啤酒花中.经PCR鉴定证明RNAi载体已成功转入啤酒花中.本研究基于RNAi技术的植物表达载体构建和农杆菌介导的遗传转化,为诱导转基因植物的转录后基因沉默、获得抗多种病毒病的植物新材料提供参考.