飞龙掌血提取物抑菌作用初步研究

选择蒸馏水、无水乙醇、乙酸乙酯、石油醚4种提取剂,采用冷浸、加热回流两种方法萃取飞龙掌血,比较提取物对枯草杆菌、痢疾杆菌、啤酒酵母菌的抑菌效果.结果表明,冷浸72h和加热回流5h的飞龙掌血提取物对该3种菌的抑菌作用无显著差异,无水乙醇、乙酸乙酯提取物较水提物有显著差异;生药质量浓度为0.25g/mL的乙醇提取物对3种菌都有极显著的抑菌效果,适宜抑菌生药质量浓度为0.5g/mL;pH值对该提取物的抑菌效果影响较大,3个菌种适宜抑菌的pH值不同.
以酿酒酵母单倍体菌株SY10作为出发菌株,采用紫外线、微波复合诱变处理其原生质体,选育出1株对钼高抗性突变株SY10-186-8,其抗性水平为400 mmol/L,是出发菌株的5.71倍.生物学功能结果表明,与出发菌株相比,该突变株拮抗紫外线、清除羟基自由基和超氧自由基能力以及黄嘌呤氧化酶活性均显著增强.经50世代培养,该突变菌株遗传稳定性良好,达90%以上.
采用微包埋培养法结合流式细胞分选技术,对白酒窖泥中的细菌进行分离和筛选,分离到95株细菌.经菌株生长实验从中筛选出8株生长较缓慢的菌株LS4、LS27、LS32、LS37、LS64、LS66、LS69’、LS85,经气相色谱分析,LS66菌株产白酒香味物质较为丰富,确定其为出发菌株.对其进行形态学观察、生理生化和16S rDNA鉴定,该菌株可能为一株窖泥未培养功能菌株uncultured bacterium clone N8-7,对该菌株的培养条件进行初步研究,菌株生长的最适温度、最适pH值和最佳发酵接种量分别为35℃、pH 6.5和4％.
利用双酶法生产玉米淀粉糖浆,使其中含95%以上可酵解的葡萄糖.然后加入啤酒酵母、酒花等采取合理可行的加工工艺进行发酵,酿制出超干基酒.在此基酒中,可加入果汁、蔬菜汁等开发系列配制酒.
为获得菌株发酵菊芋生产燃料乙醇的最佳方案,首先选取实验室保存的重组菌株R32对其产酶条件进行优化,其最高产菊粉酶活性为298.8 U· mL-1,此时的最佳培养基配方为:YPG培养基为酵母粉1％ (w/v),蛋白胨2％ (w/v),甘油0.5％ (v/v)；YPM培养基为酵母粉1％ (w/v),蛋白胨2％ (w/v),甲醇1％(v/v)；培养基pH为自然初始pH.然后选取酿酒酵母S.c和克鲁维酵母Klu,比较是否在添加重组菌株R32粗酶液条件下,两株酵母菌分别进行单独发酵和混合发酵时的产乙醇能力,以获得最佳的发酵组合.结果表明,酿酒酵母S.c和克鲁维酵母Klu在未添加重组菌株R32粗酶液时,混合一步发酵获得的乙醇含量较高,发酵84 h时乙醇含量为11.37％.添加重组菌株R32粗酶液进行两步发酵时,2株酵母菌混合发酵72 h时,乙醇含量为11.43％.2种发酵组合的最高乙醇含量以及各个发酵参数基本相同,虽然一步法发酵时间延长,但节省成本,操作简单,更适宜工业生产应用.最后对其进行正交试验优化,培养条件为菊粉浓度225 g· L-1,脲素浓度40 g·L-1,接种量15％,pH为5时,酿酒酵母菌S.c和克鲁维酵母Klu混合一步发酵法的最高乙醇体积比达11.82％.
利用微生物进行葡萄酒的降酸是葡萄酒研究工作的重点之一,微生物降酸对降低葡萄酒的生产成本、简化酿造工艺、提升品质有重要作用,本文主要从苹果酸-乳酸发酵的乳酸菌及具有降酸作用的酿酒酵母两个方面对国内外葡萄酒利用微生物降酸的研究进展加以概述.