对过量表达PaTrxS基因的T4代稳定大麦品系Y001不同灌浆期种子中α-淀粉酶和β-淀粉酶活性的变化进行了动态跟踪. 经PCR检测,转基因大麦豫啤1号(YP1)植株均出现了886 bp的目的带,说明目的基因已经整合到大麦基因组上.对不同发育时期转基因种子和对照种子的α-淀粉酶和β-淀粉酶活性进行测定,结果表明:转TrxS基因种子的α-淀粉酶活性在花后30 d内均比对照高,且峰值出现较对照早5 d;β-淀粉酶活性在整个籽粒发育时期都明显高于对照,差异达到极显著水平.表明TrxS基因对啤酒大麦的淀粉酶活性有促进作用.同时转基因大麦种子在成熟期淀粉含量和蛋白组分含量与对照相比差异并不明显.
利用啤酒废水培养极大螺旋藻(Spirulina maxima).研究了初始COD、DO、氮磷元素等培养条件对藻生物量(每mL培养液中极大螺旋藻的质量,以干重计)及废水水质的影响.实验结果表明:将废水稀释至COD=700 mg/L,控制DO=2.5 mg/L,并添加氮磷元素使废水的碳氮磷质量比为225∶15∶1,培养3d,极大螺旋藻的藻生物量可达175.55 mg/L,即每吨啤酒废水可生产极大螺旋藻175.55 g;废水中COD,TN,NH3-N,NO3-,TP的去除率分别达到85.43％,94.54％,74.66％,94.53％,61.54％.利用啤酒废水培养螺旋藻在收获极大螺旋藻生物质的同时,还能对废水起到一定程度的净化作用.
以酿酒酵母基因组为模板,采用PCR扩增出编码成熟5-氨基酮戊酸合酶(第一个氨基酸残基为Asn63)的基因hem1,将其克隆到pMAL-2x中构建重组表达载体,转化大肠杆菌表达菌株BL21(DE3),在0.5 mmol·L-1的IPTG诱导下,SDS-PAGE显示分子量约为49 kD的特异条带.重组菌在紫外灯下显示红色荧光,表明酶在大肠杆菌体内活性表达.体外反应表明,在浓度超过0.1 mmol·L-1的IPTG诱导下,酶活力下降,培养基的初始pH值约为6.5,5-氨基酮戊酸产量达最大,且主要分泌到胞外.
用2 %海藻酸钠与1 %明胶混合为包埋剂固定啤酒酵母废菌体,研究固定化啤酒废酵母对Pb2+的吸附行为.利用原子吸收光谱法测定Pb2+含量.结果表明,固定化啤酒废酵母吸附Pb2+受吸附时间、吸附温度、溶液pH值、酵母添加量和Pb2+起始浓度等因素影响.实验确定了固定化啤酒废酵母对Pb2+的最佳吸附条件.即:pH为3.0～5.0,Pb2+浓度为100 mg·L-1,酵母添加量1.2 g·L-1,吸附温度25 ℃,吸附时间120 min.在一定的浓度范围内啤酒废酵母对Pb2+的吸附符合Langmuir吸附模型和Freundlich吸附模型,但符合Freundlich吸附模型的程度更优.
葡萄籽油中富含亚油酸和其它不饱和脂肪酸,具有较高的食用和药用价值.传统的葡萄籽油提取方法存在着收率低和溶剂残留的问题.今基于对酿酒过程中废弃葡萄籽的开发利用,探讨了采用绿色洁净分离技术--超临界流体萃取技术从废弃葡萄籽中萃取葡萄籽油的可行性,重点考察了萃取温度、萃取压力、CO2用量及不同原料对葡萄籽油产率的影响.研究表明萃取压力对产率的影响较温度显著,实验确定适宜工艺条件为萃取温度55°,萃取压力30MPa.此条件下以张裕酒厂提供的籽为原料所得产率为9.71%,同时气相色谱分析表明,葡萄籽油产品中含有72.05%的亚油酸.另外,分别以三种不同来源的葡萄籽为原料进行实验,研究显示,葡萄籽油产率随原料不同而存在一定差异,产率较高者可达13.51%.
蛋白酶A(PrA)是酿酒酵母体内一种重要的非金属蛋白酶,参与液泡中多种酶的成熟加工和信号转导因子的调控等过程.本文考察蛋白酶A对单倍体酿酒酵母的抗氧化性影响.以正常单倍体酿酒酵母菌和蛋白酶A敲除的突变菌株为研究对象,探讨PEP4基因编码的蛋白酶A对酵母细胞氧化胁迫下的抗氧化调控作用.试验结果表明蛋白酶A敲除对酿酒酵母抗氧化能力有显著的负面影响.与对照菌相比,突变株在氧化应激下展现出抗氧化能力降低的特征.同时,逆境应激因子——海藻糖的积累也与酵母细胞中蛋白酶A的存在和氧化胁迫处理浓度有一定关联.
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