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工业酿酒酵母重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶部分酶学性质的研究

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-05-15 阅读:525
用刚果红法测定β-1,3-1,4-葡聚糖酶的酶活力,研究重组酿酒酵母(S.cerevisiae)菌株SC-βG分泌表达的重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶的部分酶学性质,并与出发菌株枯草芽孢杆菌(B.subtilis)表达的原始酶的性质进行比较.结果表明,重组酶保持了与原始酶相同的底物专一性.重组酶的最适反应温度为35℃,而原始酶为55℃.重组酶的热稳定性也发生了改变,40℃热处理20min只保留63.4%的最初酶活力,但温度再升高时对热处理敏感度降低,70℃的热处理20min仍保留45.9%的最初酶活力;而原始酶50℃时稳定,60℃以上的热处理酶活力损失很大.与原始酶相比,重组酶的最适pH值下降为pH5.0,而原始酶为pH6.5;相比原始酶在pH7.0有最大稳定性,重组酶在pH5.5时有最大稳定性.重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶的最适反应条件与原始酶相比更接近啤酒的实际生产条件.
[目的]研究发酵原料对苹果酒挥发性香气物质的影响.[方法]采用固相微萃取和气相色谱-质谱联用(SPME/GC/MS)技术,对苹果浓缩汁及10个苹果品种鲜榨汁酿造的苹果酒的香气进行了定性定量分析.[结果]多元统计分析发现,93%的变量可以用函数图像表示,用以区别浓缩汁和新鲜果汁酿造的苹果酒;乙酸乙酯和乙酸异戊酯分别是浓缩汁和新鲜果汁发酵的苹果酒的重要判定变量;酿酒专用品种发酵的苹果酒香气成分中,乙酸异戊酯、乙酸苯乙酯、乙酸丁酯的含量较高.而鲜食和制汁品种发酵的苹果酒香气成分中,正己醇、正丁醇、己酸的含量较高.[结论]本研究为判定苹果酒的发酵原料提供了有效的分析方法.
啤酒大麦新品种甘啤5号是由甘肃省农科院于1993年以8759-7-2-3(S-3×法瓦维特)为母本、CA2-1为父本进行有性杂交选育而成.该品种为二棱皮大麦,春性,生育期114~116 d,株高70~85 cm,穗长6.7~8.6 cm,穗粒数19.9~24.4粒,千粒重43.5~48 g.具有早熟、抗旱、稳产、优质等特点,适应于甘肃省中东部雨养旱作区和河西高海拔地区栽培种植.
垦啤二号是甘肃省农垦农业研究院选育的丰产优质啤酒大麦品种,其选育体现了优中选优的选育原则,坚持了丰产、优质、高效、适应性广、抗逆性强的选育目标,加强栽培措施的技术指导,使垦啤二号的优良特性得到更好的发挥.
[目的]四川酿酒葡萄产业起步较晚,针对该区域酿酒葡萄基础研究还是空白,与葡萄和葡萄酒质量密切相关的气候、土壤等研究严重滞后.[方法]通过对研究区域基础数据的收集,建立科学的适宜性评价指标体系、评价模型,运用模糊综合评判法,对目前酿酒葡萄主产区金沙江、大渡河、岷江3个流域进行生态适宜性评价.[结果]酿酒葡萄栽培的光、热、水适宜性指数均是大渡河>金沙江>岷江.综合考虑光、热、水3个子系统中10个指标,大渡河流域的丹巴县酿酒葡萄栽培适宜性综合指数最高,达0.901 4,岷江流域的茂县最低,只有0.619 4.[结论]在气候因子方面,大渡河流域更能种出高品质的酿酒葡萄.
为获得高产木聚糖酶酿酒酵母工程菌,利用rDNA整合法构建木聚糖酶酿酒酵母整合表达载体,实现木聚糖酶基因的多拷贝表达,并利用微滴数字聚合酶链式反应技术对转化子拷贝数进行检测,分析木聚糖酶基因拷贝数与酶活力之间的关系.结果表明:利用rDNA整合法获得了10?株不同拷贝数木聚糖酶酿酒酵母工程菌,对其酶活力进行测定,发现当拷贝数小于9时,菌株产酶能力随拷贝数增加而增强,9?拷贝数时菌株产酶能力最强,酶活力为308?U/mL,超过9?拷贝,产酶能力降低.

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