应用荧光偏振法测定酿酒酵母完整细胞膜的流动性

以酿酒酵母菌单倍体T-27(α trp- ura-)及其耐盐突变株T-27-12(α trp- ura-)为试验对象,考查了在高盐(25% NaCl) 冲击条件下菌体生物量,并应用荧光偏振法对冲击条件下菌体细胞膜的流动性进行测定,试验数据表明:高盐冲击条件下T-27-12(α trp- ura-)生物量明显高于T-27(α trp- ura-),耐盐突变株T-27-12(α trp- ura-)细胞膜的稳定性明显高于其亲株T-27(α trp- ura-),说明T-27-12(α trp- ura-)较其亲株有较强的抵御恶劣环境的能力,因而可以推断细胞膜的稳定性是耐盐突变株较其亲株有更强抵御高盐冲击的一个重要原因.
目的:获得适合蜜桔果酒发酵的非酿酒酵母.方法:从南丰蜜桔自然发酵液中分离产香酵母菌,经26S rDNA序列分析来鉴定菌株.根据单菌发酵后蜜桔酒的残糖、乙醇、总酸、pH来筛选发酵能力较好的菌株,采用顶空气相色谱质谱(headspace-gas chromatography-mass spectrometry,HS-GC-MS)分析蜜桔果酒香气成分.结果:一共分离出7株产香酵母,鉴定为Pichia fermentans、Pichia aff.fermentans、Pichia kluyveri、Hanseniaspora guilliermondii、Hanseniaspora opuntiae、Hanseniaspora thailandica、Candida ethanolica.其中,C.ethanolica具有较好的蜜桔酒发酵性能,发酵后果酒残糖为1.2 g/L,乙醇为8.9％;H.thailandica是一株发酵蜜桔果酒产香能力较好的菌株,能够产生较少的杂醇和挥发性酸和丰富的酯类物质,包括乙酸乙酯、羊蜡酸乙酯、月桂酸乙酯、辛酸乙酯、乙酸苯乙酯、丙酸乙酯、乳酸乙酯等,能够减弱尖酸味,协调苦涩味,令酒香醇厚,并且具有较好的感官评分.结论:本研究得到一株具有较好的蜜桔果酒发酵性能的酵母菌C.ethanolica,和一株产香能力较好的酵母菌H.thailandica,为后续混合发酵改善蜜桔果酒风味提供研究基础.
淀粉是丰富的生物质资源,已被广泛地应用到食品、酿酒、医药等各个相关的领域.普鲁兰酶(pullulanase,pulA,EC 3.2.1.41)作为淀粉脱支酶,可以水解淀粉中的α-1,6糖苷键,最大限度地降解淀粉原料,提高淀粉利用率.因此,寻找一条国产化的道路开发我国自己的普鲁兰酶,具有长远的意义.课题组前期从淀粉厂附近的土壤中筛到一株普鲁兰酶的高产菌株变栖克雷伯氏菌(Klebiella variicola)strain 7,克隆获得pulA基因(GenBank登录号:KJ146839.1)后在大肠杆菌(Escherichia coli) BL21 (DE3)中异源表达.为提高该蛋白的表达量和分泌效率,同时改善普鲁兰酶的性质,本研究利用基因工程的手段构建了普鲁兰酶去信号肽突变体M1和氮端31个氨基酸的截短突变体M2,结果显示M1和M2最适温度均为45 ℃,二者的最适pH分别是6.0和5.6;M2的半衰期是37 min,是M1的6.17倍;M2的比酶活是582.204U/mg,是M1的1.6倍.动力学分析显示,以普鲁兰糖为底物时,M2的Vmax、Kcat、Km和Kcat/Km分别为0.001 3μmoL/(mL·s)-1、191.80-1 s.-1、0.30 mg/mL、693.30,与M1相比,M2的底物亲和能力增加,同时催化效率是M1的2倍.本研究通过普鲁兰酶氮端氨基酸的截短,为提高酶的比酶活和半衰期提供了新的方法和思路.
本发明公开了一种白酒及其勾兑方法，该白酒由以下成分的原度酒勾兑而成：单粮浓香优级酒55～65%，五粮浓香优级酒25%～30%，浓香双轮酒2%～6%，浓香型尾酒0.5%～1.5%，酱香原酒0.1～0.3%，浓香型调味酒0.5%～1%，天然甜味剂0.2%～0.3%，己酸乙酯1%～2%，乳酸0.1%～0.2%，丁酸0.1%～0.2%，乙酸乙酯1%～2%，乙醛0.1%～0.3%，乙缩醛0.2%～0.4%，乳酸乙酯1%～2%，丁酸乙酯0.1%～0.2%，己酸0.2%～0.3%，乙酸0.5%～1%，%为体积百分百。本发明的酒体中各种香味成分达到一种维持平衡的最好状态，其内的各种成分能够很好地互补与柔和，得到的组合酒比任何单一酒香气、口感质量更好；勾调出的酒醉得慢、醒得快、醉酒度低，饮后不上头，能使饮者感到清新舒适、心旷神怡、唯美享受。
研究了超声波-中空纤维膜联用技术提取分离啤酒废酵母有效成分的工艺条件.以海藻糖提取率为指标评价了超声波破壁效果;基于超滤机理分析了超滤过程中操作压力、温度、pH和料液浓度对膜通量的影响,并用HPLC验证了MWC05000超滤膜效果;对β-1,3-萄聚糖的提取方法进行了阐述.
本发明提供了一种新型清香型白酒的勾兑方法，通过不同轮次的香型酒混合后加入酱香型原浆和竹叶以及粽叶，勾调的清香型酒白酒绵甜纯净，气味淡爽，容易入喉，第一口感极易接受，更接近消费者口感和味觉需求。