酿酒酵母异源合成己二酸

以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)为底盘生物,将来源于嗜热菌Thermobifida fusca B6中的己二酸逆降解途径基因搭配不同的酿酒酵母组成型启动子和终止子,构建在3个穿梭质粒上,并导入宿主细胞,成功实现了己二酸的异源合成.将AA-1菌株在YPD培养基中发酵,得到3.39 mg/L己二酸,是同一宿主中已报道的最高值.同时,敲除了酿酒酵母TCA循环关键基因LSC1,但未能使己二酸产量提高.通过发酵实验,研究了生物量、副产物乙醇与己二酸产量的联系;并通过改变初始碳源浓度对乙醇和己二酸产量进行了研究,为进一步提高己二酸产率、降低酿酒酵母葡萄糖效应提供了参考依据.
本发明公开了一种纯粮白酒及其酿制技术，涉及白酒酿造技术领域。包括以下重量份数的原料：玉米45?50份、糯米30?50份、花生20?30份、小麦20?30份、天麻竹根水100份以及酒曲10?15份。该纯粮白酒及其酿制技术，本发明制备工艺采用传统技术和新技术相结合，去除革新、多次试验、摸索出一套自然发酵的方法，使酒的品质上了一个新台阶，在发酵中不添加任何添加剂和发酵催化剂，在常温下，发酵时间一般为32天，冬季为35天，发酵成熟后，在蒸馏过程出酒中，掐头去尾，多次试验，酿得三乐彝乡醇纯粮酒，该酒口感香醇浓厚、绵甜爽口、无杂质、无异味、饮后口不干、不上头、酒质完全符合国家白酒标准，为酒中的上品，本发明工艺简单、可操作性强，易于实现工业化。
麦芽是啤酒酿造的主要原料,其表面附着了各类微生物,尤其是受霉菌侵染的麦芽可能引起β-葡聚糖、可溶氮和麦汁黏度升高等问题.本文研究了三种大麦在制麦过程中添加已筛选的大麦自身携带的四种霉菌对麦芽质量的影响,发现链格孢霉和镰孢霉对大麦细胞壁降解和细胞内基质溶解有明显的负作用,导致β～葡聚糖酶活力降低,β～葡聚糖含量增加,麦汁的浊度升高；其中镰孢霉对Gairdner的麦汁浊度影响最大,增加220％；添加镰孢霉的三种麦芽中蛋白酶活力和库值都有所降低,其中国产内蒙麦芽库值下降最多,下降了7.2％.
本试验旨在优化复合益生菌(酿酒酵母∶米曲霉∶枯草芽孢杆菌=5∶1∶2)发酵豆粕的生产工艺参数,并考察外源添加蛋白酶对发酵豆粕品质的影响.通过模拟工厂化规模生产,测定4个料水比水平(1∶0.3、1∶0.4、1∶0.5、1∶0.6)在发酵0、24、48、72 h时的发酵温度、pH以及初水分、粗蛋白质、真蛋白质和挥发性盐基氮含量,选择复合益生菌发酵的最优生产参数,而后在该最优参数下设计加酶试验组和无酶对照组,比较添加外源蛋白酶对发酵豆粕品质的影响.结果表明:1)不同料水比条件下发酵72 h,底物温度先升高后下降,pH缓慢下降,初水分含量逐渐提高,粗蛋白质含量在1∶0.6料水比发酵48 h时有最高值47.29％,真蛋白质含量在1∶0.4料水比发酵48 h时有最高值43.34％,挥发性盐基氮含量在1∶0.6料水比发酵48 h时有最高值38.10×10-2 mg/g.2)加入蛋白酶后发酵豆粕真蛋白质和干物质含量较对照组分别降低了2.59和4.11个百分点(P＜0.05),游离氨基酸含量提高了0.36个百分点(P＜0.05),豆粕大分子蛋白质降解程度显著升高(P＜0.05).由此可知,复合益生菌可实现对豆粕低料水比发酵,添加蛋白酶可进一步改善发酵豆粕的品质.推荐发酵参数为复合益生菌(酿酒酵母∶米曲霉∶枯草芽孢杆菌＝5∶1∶2)总添加量0.5％,蛋白酶添加量为0.01％,料水比1∶0.4,发酵48 h.酶菌协同作用可进一步提高发酵豆粕中可利用氮的质量.
本发明涉及白酒加工技术领域，公开了白酒上甑装置，包括机架、均铺机构、送料机构和放料机构，均铺机构包括甑桶、搅拌轴和驱动搅拌轴转动的电机，搅拌轴上设有搅拌叶片，电机固定安装在机架上，放料机构包括漏斗、滑板和竖直的滑动轴，滑动轴外侧设有转动轴，转动轴与滑动轴通过螺纹连接，转动轴外侧转动连接有止回棘爪、主动棘爪和棘轮，送料机构包括传送带、连杆、送料板、集气缸和气缸，气缸设有第一缸体，活塞板下部固定有第一活塞板，集气缸的活塞杆与滑动轴固定连接，集气缸设有第二缸体，集气缸的活塞杆下部固定有第二活塞板，第二活塞板下方的设有进气单向阀和压力阀。本发明方便白酒原料上甑。
【目的】在生理状态下利用激光镊子拉曼光谱系统对单个酿酒酵母孢子萌发过程进行实时监测,探讨掩盖在群体平均信息下的个体生命信息。【方法】将葡萄糖溶液加入酿酒酵母孢子悬液中诱导孢子萌发,在孢子萌发过程中每隔30 min取样并利用激光镊子拉曼光谱系统测定单个酵母孢子的拉曼光谱。【结果】单细胞实时平均拉曼光谱可显示孢子萌发过程中细胞内生物分子的变化：萌发期内分别归属于 DNA、蛋白质的722 cm-1,1006 cm-1峰的峰高基本不变,随后在生长期上升明显,说明生长期胞内开始大量复制DNA,并合成蛋白质；归属脂类的1751 cm-1峰的减弱趋势明显,可能是胞内脂类物质消耗造成的。整个萌发生长过程中,源自葡糖糖和海藻糖的858 cm-1,908 cm-1,1084 cm-1,1118 cm-1等峰强度先下降后上升,表明在适宜的生长条件下,海藻糖可能转化为单糖被细胞吸收利用,当营养物质逐渐被消耗时,细胞会再次累积海藻糖以抵抗外界不利条件。【结论】激光镊子拉曼光谱技术可反映胞内生物大分子的活动规律,获知单个酵母孢子萌发过程中物质变化的丰富信息,是探索单个活细胞实时生化变化的有效工具。