酿酒酵母ADH2基因沉默表达载体的构建

利用重叠延伸PCR获得酿酒酵母基因沉默组件SADH2,经酶切与酿酒酵母穿梭质粒pYES2.0连接,构建酿酒酵母ADH2基因沉默表达载体。经酶切及测序鉴定成功构建了ADH2基因沉默表达载体pSADH2。
[目的]优化HPLC测定酿酒葡萄中的苹果酸的色谱条件.[方法]以来自贺兰山东麓玉泉营葡萄种植基地的6个葡萄品种为试样,用HPLC法测定葡萄汁中的苹果酸含量,其色谱条件为:Zorbax SB-C18柱(5.0μm,250.0 mm × 4.6 mm)；柱温30℃；以0.02 moL/L磷酸二氢钾水溶液(pH =2.75)为流动相,进样量10.0μl,检测波长210 nm,流速0.6 ml/min,并进行了线性关系的考察,精密度和加标回收率试验以及重复性和稳定性检验.[结果]6个葡萄品种样品中的苹果酸含量范围在2.00 ～4.50 g/L,RSD为0.3％,线性相关系数R2=1.000,加标平均回收率为98.9％.该方法的色谱条件可将每种葡萄样品进行很好地分离,具有准确度高、误差小、重现性好、简便快捷的特点.[结论]建立了用HPLC法测定贺兰山东麓不同品种葡萄中苹果酸含量的方法.
研究了分离自香港红树林的红树内生真菌3893#的代谢产物,从菌丝体和发酵培养液共分离纯化得到9个化合物,通过解析波谱数据或与标准品对照确定它们的结构分别为丁二酸(A)、尿嘧啶(B)、3,5-二甲基-8-羟基-3,4-二氢异香豆素(C)、鞘糖脂(D)、棕榈酸单甘油脂(E)、麦角甾醇(F)、过氧化麦角甾醇(G)、啤酒甾醇(H)和甘露醇(I).其中化合物C和D是首次从红树内生菌分离得到的代谢产物.
新疆是我国啤酒大麦主要生产区之一,全疆年均播种面积4.7万～5.3万/hm2,在全国生态区划中,属于荒漠春大麦生态区,根据新疆气候特点和种植制度,全疆可分为四个大麦种植区:①南疆喀什、和田早熟、特早熟大麦区;②北疆阿尔泰山、塔城盆地中早熟大麦区;③南疆焉耆、拜城盆地中晚大麦区;④北疆沿天山一带及东疆早熟大麦区.
该研究以大花蕙兰'红酒'(Cymbidium hybridum'hongjiu')×莲瓣兰'边草素花'(C.tortisepalum'biancaosuhua')F1代杂交种原球茎和根状茎为材料,比较了不同激素配比增殖分化、生根的培养基,建立了适用杂交兰组培快繁体系.结果表明:1/2MS+6-BA 1.0 mg?L-1+NAA 1.0 mg?L-1+AC 0.05％+香蕉80 g?L-1对原球茎增殖效果最佳,增殖率达到307％;1/2MS+6-BA 1.5 mg?L-1+NAA 1.0 mg?L-1+AC 0.05％+香蕉80 g?L-1有利于原球茎分化,分化率为82％;1/2MS+TDZ 2.0 mg?L-1+NAA 0.1 mg?L-1+AC 0.05％+香蕉80 g?L-1对根状茎增殖分化效果最佳,增殖率为293％,分化率为79％;1/2MS+IBA 0.5 mg?L-1+NAA 0.3 mg?L-1+AC 0.05％+香蕉80 g?L-1为最佳生根培养基,生根率达到84.7％,且根粗苗壮,叶色浓绿.此体系为杂交兰种苗的规模化生产提供了技术支持.
通过红曲液体培养,研究酵母细胞对红曲霉次生代谢产物的影响.结果表明在红曲霉液体发酵中添加酿酒酵母细胞破壁液,亲水性色素提高了37.53%,疏水性色素提高了24.58%,Monacolin K增加了57.27%.