铜对葡萄酒酿酒酵母的氧化胁迫机制

[目的]研究铜离子对葡萄酒酿酒酵母的氧化胁迫作用,为葡萄酒酿造过程的铜离子控制提供依据.[方法]以模拟葡萄汁为酵母培养基,添加CuSO4分别设置0、0.05、0.1 0、0.20、0.50和1.00mmol·L-1Cu2+浓度.另外设置0.50 mmol·L-1H2O2的处理作为氧化胁迫的对比.[结果]铜胁迫下酿酒酵母细胞内超氧阴离子的产生速率和过氧化氢的含量增加.酿酒酵母膜脂过氧化程度加剧,细胞内丙二醛含量随着铜处理浓度的增加而增加.酿酒酵母细胞内超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的活性在铜胁迫下有不同程度的升高.铜胁迫下谷胱甘肽和甘油在酿酒酵母细胞内大量积累.[结论]铜胁迫刺激酿酒酵母细胞内活性氧的形成,产生与过氧化氢类似的氧化胁迫,而且酵母细胞的抗氧化酶体系和非酶抗氧化系统可协同作用减少细胞受到的伤害.
本发明涉及抑菌剂、酱香型白酒及其生产方法，属于酿酒技术领域。本发明所解决的技术问题是提供了一种抑菌剂和采用该抑菌剂生产酱香型白酒的方法。本发明抑菌剂由下述重量配比的组分组成：黄水0.5～1.5份，酱香型白酒酒尾0.5～1.5份。本发明生产酱香型白酒的方法，包括下沙步骤、糙沙步骤、1次取酒后的发酵步骤和2次取酒后的发酵步骤，其中，下沙步骤、糙沙步骤、1次取酒后的发酵步骤和2次取酒后的发酵步骤中的糟醅堆积后，在堆表面喷洒抑菌剂，然后堆积发酵；或者在下沙步骤、糙沙步骤、1次取酒后的发酵步骤和2次取酒后的发酵步骤中的糟醅堆积后，取部分糟醅用抑菌剂润湿，然后将润湿后的糟醅覆盖在糟醅堆表面。
应用扫描电子显微镜(SEM),傅立叶红外光谱(FTIR)和电子能谱(EDS)方法研究了酿酒酵母菌与铀酰离子的相互作用.电镜结果表明,吸附铀后酵母菌细胞发生一定变化,随时间延长细胞异常加剧;细胞表面有大量铀结晶,结晶量随铀浓度增加和作用时间延长而加大.能谱分析表明,酵母菌细胞表面结晶为含铀化合物.对照吸附前后的红外光谱图,细胞表面的O-H键作用后向低波数移动29 cm-1,vs(-PO2-)、糖类的C-OH的伸缩振动均移动了约21 cm-1,羧基(-COOH)的vc=o吸收带几乎完全消失;根据铀酰离子U-O键特征吸收峰推断形成的结晶可能为钙铀云母.结果表明,UO22+离子与酵母菌细胞表面发生了显著的吸附作用.
2-苯乙醇是一种具有玫瑰香气的芳香醇,作为重要香味添加剂之一广泛应用在食品、化妆品及烟草行业中.国内外崇尚利用微生物发酵法生产天然2-苯乙醇.目前国内外报道的单相单菌株产量分别达到3.6g/L和3.8g/L.本文从9株酵母及9株白地霉中筛选出一株2-苯乙醇产量达1.6886g/L的酿酒酵母菌株TYQ和另一株产量达1.0025g/L的白地霉菌株GS10A.经单因素及正交试验对酵母TYQ培养基优化,获得最佳培养基组成为:葡萄糖80g/L,L-苯丙氨酸35g/L,酵母粉10g/L,蛋白胨10g/L.该菌株在接种量10％(v/v)、28℃、120r/min条件下发酵36h的2-苯乙醇产量为4.4025g/L.
本发明提供了一种白酒催陈的方法及其专用装置。本发明基于酒体中各种成分在自然陈酿过程中的转化行为，模拟白酒自然陈酿过程及环境，利用超重力旋转床高效传质技术对白酒进行催陈，整个催陈过程，不改变任何类型纯粮酿造白酒的风格、特征，且成本低、操作简便，适宜各种类型白酒、不同规模的工业化生产。处理后的白酒色、香、味相当于自然陈酿半年至两年或更长时间的白酒。
为了探索脾酪氨酸激酶(Syk)是否参与酿酒酵母甘露聚糖(S.c M)诱导绵羊瘤胃上皮细胞(ORECs)β-防御素-1(SBD-1)表达的过程,首先利用免疫组化、RT-PCR和免疫荧光等方法检测Syk在ORECs内的表达情况;然后采用qPCR和Western blot方法检测S.c M刺激ORECs后Syk的表达变化,同时用Western blot方法检测Syk的磷酸化水平;接着用3条Syk特异性siRNAs(#1、#2和#3)转染ORECs 24 h后,qPCR检测Syk mRNA的表达变化,筛选出干扰效果最佳的Syk siRNA;最后用效果最佳的siRNA和Syk特异性抑制剂R406分别处理ORECs后,采用qPCR和ELISA检测SBD-1的表达变化,以确定Syk在S.cM诱导SBD-1表达过程中的作用.结果显示:Syk在ORECs内表达;且S.c M刺激ORECs后Syk的mRNA和蛋白表达水平显著高于未刺激组(P＜0.01或P＜0.05),S.c M刺激ORECs不同时间(5、15、30、45和60 min)均能使Syk发生磷酸化,且刺激15 min后磷酸化水平达到最大(P＜0.01);此外,Syk的3条特异性siRNAs转染ORECs后Syk的表达均降低,且Syk siRNA#2的抑制效果最明显(P＜0.01);同时Syk siRNA#2和R406均能极显著降低S.c M诱导ORECs SBD-1的表达(P＜0.01).上述结果表明,Syk参与S.c M诱导ORECs SBD-1的表达.