高耐毒性酿酒酵母的紫外诱变选育

木质纤维素生产乙醇已成为世界各国研究开发的热点.但在酿酒酵母对木质纤维素稀酸水解产物的乙醇发酵中,对水解产物中的毒性物质非常敏感.菌种对水解液毒性物质耐受力相对较低是影响木质纤维素乙醇发酵工业化的主要因素之一.利用紫外线对酿酒酵母进行诱变,得到2株高效耐水解液中毒性物质突变株k和n.2株突变株发酵未脱毒的木屑稀酸水解产物的乙醇产量分别达到理论值的71.0%和61.3%,为进一步提高酿酒酵母耐毒性的研究和木质纤维素稀酸水解生产乙醇的工业化提供了基础.
从湖北省襄阳市三九酿酒厂下水道污泥分离筛选得到产淀粉酶菌株HB-3,根据菌株生长形态和生理生化特征分析,初步鉴定为短小芽孢杆菌.短小芽孢杆菌HB-3在淀粉培养基上培养72 h后,淀粉酶活力达到120.0 U/mL.然后使用DEAE-52和CM-52阴阳离子交换层析柱对短小芽孢杆菌HB-3产生的淀粉酶进行了部分纯化.结果 表明,短小芽孢杆菌HB-3中淀粉酶经过部分纯化后,纯化倍数为5.9,酶活力回收率为90.9％.纯化后的淀粉酶使用SDS-PAGE凝胶电泳研究,以标准蛋白为对照,计算出短小芽孢杆菌HB-3中淀粉酶分子量为56.5 kDa.同时对短小芽孢杆菌HB-3的淀粉酶进行了纯化特性研究,结果表明,该酶的酶促反应最适温度为50℃,40～60℃热稳定性良好;该酶的酶促反应最适pH为5.0,pH 4.0～6.0酸碱稳定性良好,该酶对底物淀粉的反应动力学米氏常数Km为0.062 mmol/L,最大反应速率Vmax为3.019 mmol/(L·min).
本发明涉及一种糯米甜酒与白酒混合酒的制备方法，包括以下工艺步骤：第一步：选用糯米作主料经过高温蒸熟，加入甜酒药曲拌均匀，再加入25～35℃的水，置于容器内密封发酵，发酵温度控制在25～35℃，时间控制在24～36小时，有容器边见缝，且口感有甜味，即开封，在常温下保养3天以上，制成糯米甜酒中间体，其中各组份的投料重量比为：糯米100份，甜酒药曲0.6～1份，水60～100份；第二步、在糯米甜酒中间体中加入48～60°纯白酒，每100重量份糯米甜酒中间体加入100～120重量份白酒，搅拌，置于密封容器内，经过二度发酵，发酵时间三个月以上，再经过滤，沉清，罐装制成混合酒成品。此酒酒质纯和香味丰满，色泽淡黄，口感和醇，略有甜味，营养丰富，经常饮用有健脾、胃、补肾活血之功能。
[目的]克隆HBsAg和TAT-HBsAg融合基因,在酿酒酵母中同源重组表达.[方法]以HBV基因组为模板PCR扩增HBsAg和TAT-HBsAg融合基因;从酿酒酵母文库质粒pHSS6-mTn-3xHA/LacZ中筛选出可在酿酒酵母中进行同源重组且具有强启动子的质粒pHL;将质粒pHL与TAT-HBsAg融合基因酶切后连接,转化酵母进行同源重组表达;ELISA鉴定蛋白的表达.[结果]酵母中表达了HBsAg蛋白和TAT-HBsAg融合蛋白.[结论]TAT-HBsAg融合基因可以通过同源重组,在酵母细胞中进行产物表达.
本发明公开了一种白酒酒曲及其制备工艺，所述制备工艺包括下述步骤：取大米、糯米和黍米混合，磨粉制得米粉，在所述米粉中加入混合药材的粉末或上述混合药材的煎汁、以及水，并混合搅拌均匀制得柔性的坯料团；将坯料团切分成均匀的坯料小块；将上述坯料小块通过裹粉方式接种白酒酵母，然后入缸并保持缸内温度在30?38℃，时间为24?40小时；从缸中将坯料小块取出并平摊在匾中以使白酒酵母后熟，室温控制在28℃?32℃，时间为20?36小时，得到经过后熟的坯料小块；将上述经过后熟的坯料小块晾晒干燥，即得块状酒曲；所述白酒酒曲含有滋补和活血强筋类中药材有效成分能够随着酿造过程不断溶入到乙醇中，增加酒的香味。
本发明公开了一种水果白酒增香的加工方法，其包括以下步骤：先对水果干酒进行超声波和紫外线进行协同处理，得处理液；再对得到的处理液经顶空固相萃取，得香气物质并降温密闭保存；对萃取后的淬余液进行脉冲电场处理，蒸馏，得基酒；最后，将保存的香气物质添加到得到的基酒中，低温陈酿，即得水果白酒。本发明制作的水果白酒，果香浓郁，富含酯类物质，口感清爽滑润，杂醇油含量低，多饮不上头。本发明工艺简单，成本低。