超声波对酿酒酵母诱变作用的初探

通过利用现有超声波仪器对酿酒酵母进行诱变作用试验,初步探讨了超声波对酿酒酵母致突变的因果效应.试验结果表明,在相同的时间内,超声波频率越高对试验菌株的致死率越高;同一频率,超声波辐射时间增加也可使试验菌株的致死率增高,同时经过诱变处理后的菌株其生理生化特性也有变化.
基于黑曲霉CBS 513.88的基因组信息,以黑曲霉CICIM F0510为出发菌株,提取其总RNA,反转录得到cDNA,成功将其3个内切β-1,3(4)-葡聚糖酶的基因(en3gA、en3gB、en3gC)在毕赤酵母中进行了克隆与表达.获得了3个重组菌GS115(pPIC-en3gA)、GS115(pPIC-en3gB)和GS115 (pPIC-en3gC).在摇瓶水平上,这株重组菌的酶活分别为1.3、8.5和10.1 U/mL.重组酶En3 gA、En3 gB和En3gC的最适作用温度分别为65、50和55.C;最适作用pH分别为5.0、5.0和3.5.此外,3种重组酶对羧甲基纤维素钠(sodium carboxymethylcellulose,CMC-Na)和凝结多糖都具有典型的内切水解作用.这3个重组β-1,3(4)-葡聚糖酶具有良好的温度和pH稳定性,可为其在啤酒制造以及饲料加工过程中的应用奠定基础.
为筛选适合樱桃果酒发酵的优良酿酒酵母,从樱桃及土壤中采集样本,经2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,TTC)显色法初筛,果汁发酵法复筛,结合在不同条件下的菌株发酵耐受性实验,筛选出具有较强产乙醇能力和良好耐受性的酵母,然后对目的菌株进行分子生物学鉴定,并运用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用(headspace solid phase micro-extraction combine with gas chromatography mass spectrometry,HS-SPME/GC-MS)与香气活度值(odor activity value,OAV)分析果酒香气成分.结果 表明:编号为J35的酵母菌,在果汁含量为35％、糖度25°Bx条件下产乙醇量达到12.57％ vol;其在糖度45°Bx、pH 2.0、酒精度18％ vol、SO2质量浓度250 mg/L的条件下具有较好产气性能;经菌株形态和rDNA的相似性比对后,J35鉴定为酿酒酵母;其发酵的樱桃果酒为深红色,口感柔和、香气馥郁,含有辛酸乙酯、癸酸乙酯、异戊醇、苯乙醇、苯甲醛、辛酸、β-香茅醇等樱桃酒典型香气成分.
硫甙和中性洗涤纤维是限制菜籽粕饲用的两个重要抗营养因子。发酵法是降低菜籽粕抗营养因子的重要手段。通过初筛、复筛和混料设计，优选了混合菌发酵菌株和接种比例。在初筛中采用菜籽粕鉴定培养基，在复筛中对硫甙降解率、中性洗涤纤维降解率、生长曲线和蛋白酶酶活进行综合评价，在复筛的基础上采用单纯形-重心设计进行菌株配比的优化，拟合出因素与响应值之间的回归方程，得到优化的菌株接种比例为枯草芽孢杆菌B346%、纳豆芽孢杆菌N130%、酿酒酵母R124%，在此条件下进行发酵试验，硫甙、中性洗涤纤维的降解率分别为94．63%、24．17%。
本发明涉及酒类酿造技术领域，尤其涉及一种防宿醉白酒及其制备方法。本发明将柚子皮、天门冬、罗望子、洋甘菊、芹菜汁、蜂蜜与粮食共同发酵，再将蒸馏后得到的酒液与番茄汁进行调配，充分发挥柚子皮理气和中和解酒的作用；天门冬滋阴润燥，清肺降火，缓解宿醉的作用；罗望子消食化积，降低体内浓度的作用；洋甘菊中和胃酸、舒缓神经、镇定精神、纾缓情绪，提升睡眠质量的作用；芹菜汁缓解酒后胃肠不适、颜面发红的作用；蜂蜜促进酒精的分解吸收，减轻头痛症状并且助眠的作用；番茄汁促进酒精分解吸收，缓解因饮酒导致的头晕症状的作用，最终得到了一种副作用小，饮用后不易出现宿醉症状的白酒。
从八二酒曲及酿造崇明老白酒过程中分离纯化得到1株白色酵母菌和1株红色酵母菌，采用分子生物学方法进行鉴定，并对其酿造老白酒的特性进行了分析。结果显示，八二酒曲及崇明老白酒酿造过程中的优势酵母菌为酿酒酵母（Saccaromyces cerevisiae），从酿酒过程中分离的红色酵母菌为粘红酵母（Rhodotorula mucilaginosa ）。采用粘红酵母和米根霉曲酿造的酒液的酒精度为11．9％vol，残余还原糖含量为11．2 g／100 mL，总酸含量为4．59 g／L，总酯含量为4．42 g／L。纯化的酿酒酵母和米根霉曲酿成的酒液口味醇和爽口，酒曲的纯化有助于开发出口感更爽口的老白酒。混合酵母和米根霉曲酿造的酒液呈典型的崇明老白酒风味，粘红酵母的参与对崇明老白酒口味风格的形成有一定的作用。