目的:为了降低在葡萄酒酿造过程中酿酒酵母的乙醇产量.方法:将编码NADH氧化酶的Spnox基因过量表达于酿酒酵母T73中,构建胞内异源NADH氧化途径.结果:与出发菌株酿酒酵母T73/pY26相比较,重组菌株酿酒酵母T73/pY26-Spnox胞内总NADH氧化酶活性提高49％,胞内NADH/NAD+比率降低了9％;酿酒酵母T73/pY26-Spnox发酵模拟葡萄汁所获得的乙醇产量及醇类物质总量分别降低了7％和13％,挥发酸增加了4.5％,挥发性物质种类和含量略有增加.结论:过量表达NADH氧化酶可使葡萄酒在发酵条件下,酿酒酵母合成乙醇或其它醇类物质的能力降低,为进一步优化葡萄酒发酵条件生产降醇葡萄酒打下基础.
从酿酒小曲中分离获得优质产酯菌株Y5,经产酯培养基初筛其总酯2.684 g/L,乙酸乙酯含量为2.481g/L.经生理生化实验和分子鉴定,确定Y5菌株为异常威克汉姆酵母(Wickerhamomyces anomalus).通过采用单因素和四因素四水平正交实验对该菌产酯条件进行优化,试验结果表明在初始pH 4、乙醇体积分数4％的培养基中30℃恒温发酵3d为最适产酯条件,其Y5菌株总酯产量为4.065 g/L,乙酸乙酯产量3.677 g/L.相比优化之前,其总酯含量显著提高51.5％,乙酸乙酯含量显著提高48.2％.
目前工业上尚无酿造沙棘果酒的专用酵母菌,因此,筛选出适合酿造沙棘果酒的优良酵母菌尤为必要.利用ITS1-5.8S-ITS2 rDNA序列分析及构建系统发育树对自选酵母菌Y23进行分子生物学鉴定.结果表明,克隆的自选酵母菌Y23的5.8S-ITS rDNA序列(GenBank接受号:FJ793809)伞长874bp.自选酵母菌Y23与Saccharomyces cerevisiae CBS423T(AM262829)的遗传距离最近,两者之间的同源性为100%,因此,鉴定酵母菌Y23为酵母属(Saccharomyces)酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae).通过响应面分析法研究初始糖度、发酵温度、接种量对自选酵母菌Y23酿造沙棘果酒品质的影响,得出沙棘果酒质量与影响因素间的回归模型,并根据模型进行工艺参数优化.结果表明,接种量对沙棘果酒质量的影响极显著(P<0.01).利用自选酵母菌Y23酿造沙棘果酒的最佳工艺参数是:初始糖度19.9%、发酵温度25.4℃、接种量10.3%.
本文总结了近年来我校木瓜蛋白酶的研究及应用进展.1)对国产木瓜乳汁粗酶进行了分离与纯化,得到了重结晶的木瓜蛋白酶和木瓜凝乳酶,结晶分别为柱状和针状;2)为了提高木瓜蛋白酶活性检测的准确性,增强国际市场的竞争能力,采用紫外分光光度法,茚三酮显色法及BAEE法对国内外不同来源的木瓜蛋白酶进行了比较,找出以上3种方法的最适反应条件、提出了在工农业生产中的应用途径;3) 在研制木瓜蛋白酶的基础上,利用酶工程方法,制备了纤维素固定化木瓜蛋白酶和琼脂固定化木瓜蛋白酶,增强了酶的热稳定性及保存性,用于啤酒生产可以提高防浊效果、增进氨基酸营养;4)与广州园艺公司、广州酶制剂厂及前进食品厂等合作,进行了木瓜蛋白酶的系列产品开发,陆续研制出国产嫩肉粉、啤酒澄清剂、饼干松化剂、饲料添加剂等新产品,在食品工业和饲料工业中获得了较好的效益.
本发明公开了一种用五种黑色杂粮制作白酒的方法，制作白酒所用原料及其重量份配比为：黑玉米1-10份，黑小麦1-6份，黑豆0.5-1份，黑糯米1-6份，高粱1-7份；具体制作步骤包括浸泡、第一次生料液态发酵、蒸馏、第二次熟料发酵和压榨。本发明工艺方法独特，创新性地将白酒工艺和葡萄酒工艺相结合，酿制的白酒，色泽红艳透明，口感醇厚，富含花青素和硒，营养价值高，是一种集白酒与葡萄酒优点与一身的新型白酒。
从黑曲霉eDNA文库中筛选出糖化酶基因，并在酿酒酵母中进行表达．阳性克隆在发酵培养基中培养60h后，产生的糖化酶酶活力达到峰值为4．3U／mL．测定结果显示其糖化酶大小为1908bp，编码636个氨基酸残基组成的蛋白质．酶学性质分析显示该酶的最适反应温度为50℃，pH为5．0．经柱分离纯化其发酵上清液后，SDS-PAGE电泳方法，测得它的分子量大约为70kD，且条带清晰．
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